方法名稱： |
辣椒制品—辣椒素—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于辣椒制品中辣椒素含量的測定 |
方法原理： |
本品加入甲醇+四氫呋喃（50+50)混合溶液超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在280 nm處測定峰面積，外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器 高效液相色譜儀（Agilent 1100)，美國安捷倫公司 色譜條件 色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18（5 μm，250×4.6 mm)；流動相：V（甲醇)：V（水)=80：20；流速：0.8 mL/min；柱溫30.0℃；檢測波長：280 nm；進(jìn)樣量：10 μL |
試樣制備： |
對照品溶液制備 精確稱取25 mg辣椒素和25 mg二氫辣椒素放入經(jīng)甲醇洗滌過的燒杯中，加入少量甲醇溶解，然后溶液轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶中，用甲醇定容，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。分別精密量取辣椒素、二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)貯備液各1 mL置于10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。 供試品溶液制備 將辣椒制品搗碎、均質(zhì)，準(zhǔn)確稱取2.5g樣品于100 mL燒杯中，加入甲醇+四氫呋喃（50+50)混合溶液25 mL，用塑料薄膜封口，然后使用超聲波清洗器提取30 min。用濾紙過濾，收集濾液，然后將濾渣連同濾紙重新用甲醇+四氫呋喃（50+50)混合溶液25 mL，使用超聲波清洗器提取10 min，重復(fù)兩次。將三次過濾收集的濾液合并并濃縮，然后用甲醇+四氫呋喃（50+50)混合溶液定容至50 mL，經(jīng)0.45 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取辣椒素對照液以及辣椒制品供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算辣椒素含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
王燕，夏延斌，熊科等.高效液相色譜法-紫外檢測器測定辣椒制品中辣椒素的含量.食品科學(xué). 2006.27（9)： 193～196 |
