1 試劑
1.1 0.31mol /L 三氯醋酸
稱(chēng)取三氯醋酸5g,加蒸餾水溶解zxtf.net.cn成100ml。
1.2 0.61 mol /L三氯醋酸
稱(chēng)取三氯醋酸10g,加蒸餾水溶解成100ml。
1.3 0.019mol /L 三氯化鐵-鹽酸溶液
稱(chēng)取三氯化鐵(FeCl3·6H2O)0.5g,加濃鹽酸溶解成500ml,可長(zhǎng)期使用。
1.4 1%二羥基甲苯(苔黑酚)
稱(chēng)取二羥基甲苯1g,溶于0.019mol /L 三氯化鐵-鹽酸溶液中,臨用新配。
1.5 標(biāo)準(zhǔn)核糖溶液
精密稱(chēng)取D核糖20mg,溶于0.31mol /L 三氯醋酸,準(zhǔn)確稀釋至100ml為200μg /ml核糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液。精密吸取貯備液2.5ml于25ml容量瓶中,用0.31mol /L 三氯醋酸稀釋至刻度,即為標(biāo)準(zhǔn)核糖溶液(20μg/ml)。
2 操作
精密量取轉(zhuǎn)移因子待檢品1ml于試管中,另0.61mol /L三氯醋酸1ml,置沸水浴水解15分鐘,再吸取水解液0.4ml,加0.31ml/L三氯醋酸1.6ml,及1%二羥基甲zxtf.net.cn/zhicheng/苯2ml,混勻,再置沸水浴中加熱30分鐘,冷卻至室溫,在650nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值,同時(shí)準(zhǔn)確吸取核糖標(biāo)準(zhǔn)液1ml,加0.31mol/L三氯醋酸1ml,混勻,其余操作同樣品,并做空白對(duì)照。
3 計(jì)算
樣品OD值
核糖含量(μg/ml)= ─────×20×5
標(biāo)準(zhǔn)OD值