方法名稱: |
濟(jì)銀花與川銀花—綠原酸的含量測(cè)定—HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于濟(jì)銀花與川銀花中綠原酸含量的測(cè)定 |
方法原理: |
本品藥材加乙醇回流提取,提取物加甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在326 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器 235C2250高效液相色譜儀,美國(guó)PE公司生產(chǎn) 色譜條件 色譜柱:瑞典kromasil C18 (5 μm,250 mm ×416 mm);流動(dòng)相:甲醇-水(15∶85) (內(nèi)含0.2 mol/L磷酸二氫鈉,磷酸調(diào)pH為3.2);檢測(cè)波長(zhǎng):326 nm |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取綠原酸對(duì)照品適量,加甲醇溶解并制成每1 mL含0.02 mg的溶液,即得。 供試品溶液制備 1)金銀花藥材供試品溶液的制備:取金銀花4 g,精密稱定,加乙醇100 mL,水浴加熱回流1 h,如此提取二次,濾液合并于200 mL量瓶中,冷卻,加乙醇至刻度,搖勻。精密量取此液1 mL,置10 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。2)金銀花提取物供試品溶液的制備:精密稱取本品粉末約10 mg,加甲醇45 mL,超聲處理2 min,濾過(guò),用少許甲醇洗滌,置50 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取綠原酸對(duì)照液以及金銀花藥材、金銀花提取物供試品溶液10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算綠原酸含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
馮文宇,田吉,何兵. 濟(jì)銀花與川銀花綠原酸含量及提取率實(shí)驗(yàn)研究. 中藥材. 2006,29(1):30~31 |