方法名稱: |
蘆薈—β-胡蘿卜素—RP-HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于蘆薈中β-胡蘿卜素含量的測(cè)定 |
方法原理: |
本品勻漿加入丙、石油醚提取,經(jīng)液相色譜分離,在450 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器 Waters515液相色譜儀(美國Waters公司),配用2487 紫外檢測(cè)器,Millenium32色譜工作站 色譜條件 色譜柱:Supelco(2.5 mm×250 mm,4 μm);流動(dòng)相:甲醇∶氯仿=85∶15(v/v);流速:0.5 mL/min;檢測(cè)波長:450 nm |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品置于容量瓶中,以三氯甲烷溶解并稀釋至刻度,配制適宜濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。 供試品溶液制備 取勻漿樣品1~5 g置于100 mL具塞錐形瓶中,加入丙酮20 mL,石油醚5 mL,振搖10 min,靜置5 min,將提取液轉(zhuǎn)入盛有100 mL 5 %硫酸鈉液的分液漏斗中,于錐形瓶中加入10 mL丙酮- 石油醚混合液(3∶7 v/v)提取,將提取液并入分液漏斗中。如此提取2~3次,直至提取液使無色為止。將上述提取液經(jīng)5 %硫酸鈉溶液洗滌后,進(jìn)行濃縮,并用氮?dú)獯蹈,加? mL甲醇溶解、過濾,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取β-胡蘿卜素對(duì)照液以及蘆薈供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算β-胡蘿卜素含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
雷紹榮,歐陽華學(xué).反相高效液相色譜法測(cè)定蘆薈中β-胡蘿卜素含量.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2005. 18(6): 874~875 |