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蘆薈—β-胡蘿卜素—RP-HPLC

  
方法名稱:
  蘆薈—β-胡蘿卜素—RP-HPLC
應(yīng)用范圍:
  本方法適用于蘆薈中β-胡蘿卜素含量的測(cè)定
方法原理:
 本品勻漿加入丙、石油醚提取,經(jīng)液相色譜分離,在450 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器    Waters515液相色譜儀(美國Waters公司),配用2487 紫外檢測(cè)器,Millenium32色譜工作站

色譜條件    色譜柱:Supelco(2.5 mm×250 mm,4 μm);流動(dòng)相:甲醇∶氯仿=85∶15(v/v);流速:0.5 mL/min;檢測(cè)波長:450 nm

試樣制備:
 

 對(duì)照品溶液制備    精密稱取β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品置于容量瓶中,以三氯甲烷溶解并稀釋至刻度,配制適宜濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

供試品溶液制備    取勻漿樣品1~5 g置于100 mL具塞錐形瓶中,加入丙酮20 mL,石油醚5 mL,振搖10 min,靜置5 min,將提取液轉(zhuǎn)入盛有100 mL 5 %硫酸鈉液的分液漏斗中,于錐形瓶中加入10 mL丙酮- 石油醚混合液(3∶7 v/v)提取,將提取液并入分液漏斗中。如此提取2~3次,直至提取液使無色為止。將上述提取液經(jīng)5 %硫酸鈉溶液洗滌后,進(jìn)行濃縮,并用氮?dú)獯蹈,加? mL甲醇溶解、過濾,即得。

操作步驟:
  分別精密吸取β-胡蘿卜素對(duì)照液以及蘆薈供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算β-胡蘿卜素含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:zxtf.net.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  雷紹榮,歐陽華學(xué).反相高效液相色譜法測(cè)定蘆薈中β-胡蘿卜素含量.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2005. 18(6): 874~875
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