方法名稱: |
金銀花及葉—黃酮類物質的含量測定—HPLC |
應用范圍: |
本方法適用于金銀花及葉中黃酮類物質含量的測定 |
方法原理: |
本品粉碎后加甲醇超聲提取,經液相色譜分離,在350 nm處測定峰面積,外標法計算含量 |
儀器設備及實驗條件: |
儀器 高效液相色譜儀Agilent 1100 (Agilent公司) 色譜條件 色譜柱:Zorbax 80A,Extend—C18(250 mm ×4. 6 mm,5 μm);流動相:甲醇∶0.02%磷酸(50∶50);流速:1. 0 mL/min;檢測波長:350 nm ;柱溫:30 ℃;進樣量:10 μL |
試樣制備: |
對照品溶液制備 準確稱取槲皮素對照品0.0300 g,用甲醇溶解并定容于50 mL容量瓶,配制成0.60 mg/mL的溶液。取該溶液1.00 mL,用甲醇稀釋并定容至10 mL,即得濃度為0.06 mg/mL的槲皮素對照品溶液,記為溶液A。以相同的方法制備濃度為0.057 mg/mL的木犀草素對照品溶液,記為溶液A。以相同的方法制備濃度為0.057 mg/mL的木犀草素對照品溶液,記為溶液B。取1 mL溶液A和1 mL溶液B,混合均勻成溶液C,即得。 供試品溶液制備 分別稱取5 g經過干燥粉碎的金銀花和金銀花葉各一份,用100 mL甲醇在40 ℃超聲提取30 min,過濾,減壓濃縮,濃縮液用石油醚除雜,然后用甲醇定容至25 mL容量瓶,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取槲皮素、木犀草素混合對照液以及金銀花供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算黃酮類物質含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻: |
王麗婷,楊敏麗. 高效液相色譜法同時測定金銀花及葉中的黃酮類物質. 時珍國醫(yī)國藥. 2007,18(8):1850~1851 |