藥物分析-授課教案:第三章藥物的雜質(zhì)檢查

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

第一節(jié)  藥物的雜質(zhì)及其來源

一、藥物的純度

指藥物純凈程度，反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣，含有雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素。

雜質(zhì)（forin、impurities)是指：

①有毒副作用的物質(zhì)

    ②本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)

③本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)

二、藥物中雜質(zhì)的來源

1. 生產(chǎn)過程中引入

（1)原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物；

（2)試劑、溶劑、催化劑類；

(3)生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)。

2. 貯藏過程中產(chǎn)生

水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等。

易發(fā)生水解反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：

酯、內(nèi)酯、酰胺、鹵代烴、苷類等。

易發(fā)生氧化反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：

醚、醛、酚羥基、巰基、亞硝基、雙鍵等。

三、雜質(zhì)的分類

藥物中的雜質(zhì)按來源分為

1. 一般雜質(zhì)：如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、易炭化物、熾灼殘?jiān)�等。一般雜質(zhì)其檢查方法收載在中國藥典的附錄中。

2. 特殊雜質(zhì)：指某一個(gè)或某一類藥物的生產(chǎn)或貯藏過程中引入的雜質(zhì)，如阿司匹林中的游離水楊酸、 異煙肼中的游離肼、甾體激素中的其他甾體。特殊雜質(zhì)檢查方法收載在中國藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。

四、藥物的純度與化學(xué)試劑的純度

藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥品只有兩個(gè)等級：合格或不合格。

    化學(xué)試劑有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純（GR)、分析純（AR)、化學(xué)純（CP)、色譜純、光譜純。

復(fù)習(xí)舊課（3min)

引入新課（2min)

10min

掌握雜質(zhì)的概念，它是反映藥品質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)。

15min

一般雜質(zhì)與特殊 雜質(zhì)的區(qū)分。

二種純度的區(qū)分

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

五、雜質(zhì)限量 

指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm)來表示

雜質(zhì)量 ≤ 雜質(zhì)限量 ＜ 雜質(zhì)量

藥品合格 藥品不合格

(1)、藥物的雜質(zhì)檢查法

1. 對照法

  限量檢查法 （Limit Test)

　  特點(diǎn)：（1)需要對照品

　　　　　   （2)不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量

2. 靈敏度法

系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)。

特點(diǎn)：不需對照品

3.含量測定法

測定雜質(zhì)的絕對含量，如測定吸收度、pH值等。

    特點(diǎn)：準(zhǔn)確測定雜質(zhì)的量，不需對照品

4. 雜質(zhì)限量的計(jì)算

20min

掌握限量的計(jì)算

基本內(nèi)容

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手段和時(shí)間分配)

   第二節(jié) 一般雜質(zhì)檢查方法

一、 氯化物檢查法

（一)   原理  對照法

（二)檢查方法  藥典附錄

（三)測定條件

1. 標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液 10mgCl-/ml，50ml溶液中含50～80mg的Cl-所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5～8ml。

2. 反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

（1)加速AgCl渾濁的形成；

（2)產(chǎn)生較好的乳濁；

（3)避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。

3. 試劑：硝酸銀

4. 供試液和對照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

5. 避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見光易分解。

6. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。

7. 平行操作原則

（四)干擾及排除

1. 若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

（1)內(nèi)消色法：倍量法，如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查。

（2)外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。

2. 當(dāng)有其它干擾物質(zhì)存在時(shí)，必需在檢查前除去

（1)碘中氯化物的檢查

（2)碘化物中氯化物的檢查

（3)溴化物中氯化物的檢查

10min

通過PPT講解。

和實(shí)驗(yàn)結(jié)合起來講解。

在實(shí)驗(yàn)過程中學(xué)生易出現(xiàn)哪些錯(cuò)誤？

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

二、  硫酸鹽檢查法

（一)   原理  對照法

（二)測定條件

2. 反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。

3. 試劑：氯化鋇

4. 供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

5. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。

（三)干擾及排除

若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。

三、鐵鹽檢查法

（一)硫氰酸鹽法 ChP（2005)

1. 原理  對照法

2. 檢查方法  藥典附錄

除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成 35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對照溶液（取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，

加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻)比較，即得。

10min

同置于黑色背景上，自上向下觀察

10min

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

3. 測定條件

（1)用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸鐵銨)配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（加入硫酸防止Fe3+的水解)，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液10mg Fe3+/ml，50ml溶液中含10～50mg的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0～5.0ml 。

（2)反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。

（3)試劑：硫氰酸銨。加過量硫氰酸銨(鐵鹽與硫氰酸根離子的反應(yīng)為可逆反應(yīng))，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行

（4)檢查Fe2+和Fe3+

Fe²⁺+(NH₄)₂S₂O₈ Fe³⁺+(NH₄)₂SO₄+SO₄^2-

加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+

（6)比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。

4. 干擾及排除

（1)為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時(shí)，可用正丁醇或異戊醇提取后，分取醇層比色。

（2)具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)700～800℃熾灼破壞處理使鐵鹽變成三氧化二鐵后再依法檢查。

（3)干擾離子的影響

五、重金屬檢查法 以鉛為代表

中國藥典（2005年版)共收載四法。

（一)第一法  硫代乙酰胺法

1. 原理  對照法

適用于在實(shí)驗(yàn)條件下供試液澄清、無色，對檢查無干擾或經(jīng)處理后對檢查無干擾的藥物。

2. 測定條件

（1)用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解)，標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10mg Pb2+/ml，適宜比色范圍為27ml溶液中含10～20mg的Pb2+。

（2)本法用2ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.5。

（3)顯色劑：從ChP（1990)開始改用硫代乙酰胺做顯色劑。

同置于白色背景上，自上向下觀察

20min

中國藥典（2005年版)共收載四法

以鉛為代表

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

3. 干擾及排除

（1)供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

A. 外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。

B. 內(nèi)消色法

C. 改用第四法，微孔濾膜過濾法

（2)若供試品中有微量Fe3+存在，會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.5～1.0g)還原Fe3+為Fe2+，可消除干擾

（3)若供試品為鐵鹽，F(xiàn)e3+在鹽酸中生成HFeCl ，用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法檢查

（二)第二法  熾灼殘?jiān)��?/p>

適用于在水、乙醇中難溶，或能與重金屬形成配位化合物的有機(jī)藥物。

1. 原理  對照法

500～600℃熾灼后的殘?jiān)�，�?jīng)處理后，依一法檢查。

2. 操作方法

含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬)

（三)第三法  硫化鈉法

適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。

1. 原理   對照法

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

2. 測定條件

（1)NaOH堿性條件下

（2)顯色劑：硫化鈉

（四)第四法  微孔濾膜法

適用于含2～5mg重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。

  依一法檢查，結(jié)果微孔濾膜過濾后比較色斑。

六、砷鹽檢查法

(一)、古蔡法

1. 原理  對照法

遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較

2. 操作方法

（1)標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備

（2)供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作

3. 測定條件

（1)標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，1mgAs/ml。

（2)酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。

（3)酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：

A. 還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度；

B. 碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，

I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子（[ZnI4]2-)，

有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行；

   其反應(yīng)如下：

25min

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

C. 氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；

D. 可抑制微量Sb的干擾，在實(shí)驗(yàn)條件下，100 mgSb存在不干擾。

（4)醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝管高度60～80mm。

（5)鋅粒應(yīng)無砷。

（6)砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察。

4. 干擾及排除

（1)供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，加HNO3，△，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。

（2)供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。

常用的有機(jī)破壞方法：

堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法

    酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查

（4)本法適用于不含Sb或含Sb量小于100mg的供試品。

（二)   二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法)

檢查、含量測定 ChP(2000)、USP（24)

對照法

砷化氫與Ag-DDC溶液作用，還原Ag—DDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm波長處測定吸收度，進(jìn)行比較。

用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。

USP（24)用吡啶zxtf.net.cn/zhicheng/，ChP（2000)用三乙胺。 

本法適用于含Sb量小于500mg的供試品。

（三)次磷酸法

原理 對照法

酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是？

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

七、熾灼殘?jiān)鼨z查法

檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無機(jī)藥物中混入的無機(jī)雜質(zhì)(金屬氧化物或無機(jī)鹽類)。

1. 原理

樣品炭化后+ H2SO4濕潤→700～800℃熾灼至恒重→熾灼殘?jiān)�（硫酸灰�?

  限量一般為0.1%～0.2% 

2. 操作方法

3. 注意事項(xiàng)

（1)供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)�限量和稱量誤差決定。

（2)含氟的藥物對瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。

（3)若殘?jiān)�需留作重金屬檢查，則熾灼至恒重溫度必須控制在500～600℃，以防重金屬（如鉛)揮發(fā) 。

（4)加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化

八、溶液顏色檢查法

控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法。

ChP(2005)采用三種方法檢查。

第一法  目視比色法  即與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法，全波長范圍定性觀察

觀察方法

標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制

第二法  分光光度法  單一波長定量

第三法  色差計(jì)法  全波長范圍定量

本法是通過色差計(jì)直接測定溶液的透視三刺激值，對其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。

測色儀器一般為光電積分型色差計(jì)

10min

檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無機(jī)藥物中混入的無機(jī)雜質(zhì)(金屬氧化物或無機(jī)鹽類)。

5min

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

九、易炭化物檢查法

檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。

方法：H2SO4炭化后與對照液比較。 

對照液（三類)：

（1)“溶液顏色檢查”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；

（2)由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對照液；

（3)高錳酸鉀液

比色：同置白色背景前，平視觀察比較。

十、澄清度檢查法

檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。

1. 檢查方法  對照法

2. 濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制

中國藥典規(guī)定用濁度標(biāo)準(zhǔn)液作為澄清度檢查的標(biāo)準(zhǔn)。

反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。

反應(yīng)式：

1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液   濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5個(gè)級號(hào))

　　　　　  不同級號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液

3. 判斷  藥典中規(guī)定的“澄清”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液。若供試液的乳色比0.5號(hào)明顯，而不及1級時(shí)，稱為濁度0.5號(hào)，其余類推。

4. 溶劑：水、酸、堿、有機(jī)溶劑。

10min

同置白色背景前，平視觀察比較。

15min

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

十一、干燥失重測定法

干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測定方法：

（一)常壓恒溫干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105℃。

干燥失重：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。

熾灼殘?jiān)�：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)熾灼０.5h后進(jìn)行。

1.供試品平鋪于扁形稱量瓶中。

2.若含結(jié)晶水較多，要可提高干燥溫度。

3.若含較大量水分且熔點(diǎn)又較低，可逐漸升高溫度，在105 ℃干燥至恒重。

4.易吸濕或受熱發(fā)生相變而達(dá)不到恒重的藥物，采用一定溫度下、干燥一定時(shí)間所減失的重量代表干燥失重。

5.膏狀物，用干燥至恒重器皿，攪拌數(shù)次至恒重。

（二)干燥劑干燥法

適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。

干燥劑：硅膠、濃硫酸、P2O5 。

（三)減壓干燥法

適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。

除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg)以下。

（四)熱分析法

熱分析法是在程序控制溫度下，精確記錄待測物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過程所發(fā)生的晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化和脫水、熱分解、氧化還原等化學(xué)變化，對物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)（如熔點(diǎn)和沸點(diǎn))的確定、鑒別和純度檢查的方法。

亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制劑輔料的優(yōu)選

1. 熱重法（TGA)  

熱重法是在程序控制溫度下，測量物質(zhì)質(zhì)量與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。

記錄質(zhì)量變化對溫度的關(guān)系曲線即熱重曲線。熱重曲線的縱坐標(biāo)為質(zhì)量(m)，橫坐標(biāo)為溫度(T)或時(shí)間(t)。

10min

有哪些干燥方法？

結(jié)合物化的知識(shí)講解。

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

特點(diǎn)：準(zhǔn)確測量物質(zhì)的質(zhì)量變化及變化速度、樣品用量少、速度快

本法適用于藥物結(jié)晶水的測定和貴重藥物或在空氣中極易氧化藥物的干燥失重分析。  

2. 差熱分析法（DTA)

差熱分析法是在程序控制溫度下，測量待測物質(zhì)和參比物之間的溫度差（△T)與溫度(或時(shí)間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)。

差熱分析曲線記錄的縱坐標(biāo)為樣品與參比物的溫度差(DT)，DT與熱容量差(CR—Cs)成正比，橫坐標(biāo)為溫度。

3. 差示掃描量熱法（DSC)

差示掃描量熱法是在程序控制溫度下，測量輸給待測物質(zhì)和參比物的能量差與溫度(或時(shí)間)關(guān)系的一種技術(shù)。

十一、水分測定法

費(fèi)休氏法和甲苯法

A-供試品所消耗費(fèi)休氏試液的容積(ml)；B-空白所消耗費(fèi)休氏試液的容積(ml)；F-每1ml費(fèi)休氏試液相當(dāng)于水的重量(mg);W為供試品的重量。

費(fèi)休氏法和甲苯法

15min

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

十二、殘留溶劑量測定法

1. 有機(jī)溶劑殘留量測定法

是用以檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害有機(jī)溶劑，包括苯、氯仿、二氧六環(huán)、二氯甲烷、吡啶、甲苯及環(huán)氧乙烷。

2. 檢查方法  中國藥典采用氣相色譜法檢查殘留有機(jī)溶劑

色譜條件：

固定相：直徑為0.25～0.18mm的二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孔小球

載氣：氮?dú)?/p>

檢測器：氫火焰離子化檢測器檢測

柱溫：80～170℃

色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：中國藥典規(guī)定，在殘留溶劑測定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。

（1)用待測物的色譜峰計(jì)算的理論塔板數(shù)應(yīng)大于1000；

（2)用內(nèi)標(biāo)法測定時(shí)，內(nèi)標(biāo)物與待測物色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5；

3. 測定法

殘留溶劑的測定有直接進(jìn)樣法（第一法)和頂空進(jìn)樣法（第二法)兩種。

第一法  溶液直接進(jìn)樣法

第二法  頂空進(jìn)樣法

從方法的精密度考慮，二氧六環(huán)、吡啶宜用第一法；苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷可用第一法或第二法，環(huán)氧乙烷直接用第二法。

10min

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

第三節(jié)　特殊雜質(zhì)檢查方法

特殊雜質(zhì)是指不同的藥物，由于其合成工藝、原料和結(jié)構(gòu)性能等不同，在生產(chǎn)和貯藏過程中可能引入的雜質(zhì)。

　　檢查：主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行。

一、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異

(一)臭味及揮發(fā)性的差異

1.雜質(zhì)的特殊氣味

　  2.藥物揮發(fā)，雜質(zhì)不揮發(fā)

（二)顏色的差異

采用檢查供試品溶液顏色的方法，可以控制藥物中有色雜質(zhì)的量。

如磺胺嘧啶的檢查、酚酞的乙醇溶液顏色檢查等。

磺胺嘧啶的檢查規(guī)定：

取本品2.0g，加氫氧化鈉試液10ml溶解后，加水至25ml，溶液應(yīng)澄清無色；如顯色，與黃色3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深。

顯色原因：其氧化產(chǎn)物為有色的偶氮苯化合物。

（三)溶解行為的差異

有的藥物可溶于水、有機(jī)溶劑或酸、堿中，而其雜質(zhì)不溶；或反之，雜質(zhì)可溶而藥物不溶。

如吡哌酸在堿溶液中易溶，而其可能雜質(zhì)雙吡哌酸甲酯（A)及吡哌酸甲酯(B)均為堿中不溶物。選用氫氧化鈉作為溶劑，控制供試品溶液的澄清度，可以限制（A)、（B)的量。

（四)旋光性質(zhì)的差異

具有旋光性的物質(zhì)稱為光學(xué)活性物質(zhì)。

比旋度（或旋光度)的數(shù)值可以用來反映藥物的純度，限定雜質(zhì)的含量。如黃體酮的雜質(zhì)檢查。

若藥物本身沒有旋光性，而其雜質(zhì)有，則可以通過限定藥物溶液的旋光度值來控制相應(yīng)雜質(zhì)的量。如硫酸阿托品中莨菪堿的檢查。

（五)對光吸收性質(zhì)的差異

1、紫外分光光度法

　　當(dāng)雜質(zhì)在某一波長處有最大吸收，而藥物在此無吸收時(shí)，可以通過控制供試品溶液在此波長處的吸收度來控制雜質(zhì)的量。如地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查。

40min

特殊雜質(zhì)是？

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

當(dāng)雜質(zhì)紫外吸收光譜與藥物的紫外吸收光譜重疊，但可以通過控制供試品溶液的吸收度比值來控制雜質(zhì)的量。如苯丙醇中苯丙酮的檢查。

當(dāng)藥物在紫外區(qū)有明顯吸收，而雜質(zhì)吸收很弱或沒有吸收，可以根據(jù)吸收度大小限制雜質(zhì)的量。

2、原子吸收分光光度法

先將對照溶液噴入火焰，調(diào)節(jié)儀器使具有合適的讀數(shù)a；在相同條件下噴入供試品溶液，記錄其讀數(shù)b。B相當(dāng)于供試品溶液中待檢元素的含量；（a-b)相當(dāng)于對照品溶液中按限量加入的待檢元素的量。

當(dāng)b<(a-b)時(shí)，供試品中所含雜質(zhì)元素符合規(guī)定；當(dāng)b>(a-b)時(shí)，供試品中所含雜質(zhì)元素超過限量，不合格。

如碳酸鋰中鉀鹽的檢查。

3、紅外分光光度法

主要用于藥物中無效或低效晶型的檢查。

某些多晶型藥物由于其晶型結(jié)構(gòu)不同，一些化學(xué)鍵的鍵長、鍵角等發(fā)生不同程度的變化，從而導(dǎo)致紅外吸收光譜中某些特征峰的頻率、峰形和強(qiáng)度出現(xiàn)顯著差異。如甲苯咪唑中A晶型的檢查。

4、熒光分析法

利用物質(zhì)的激發(fā)和發(fā)射光譜，對物質(zhì)進(jìn)行分析的方法為熒光分析法。

如利血平中氧化產(chǎn)物的檢查。

（六)吸附或分配性質(zhì)的差異

藥物中的一些雜質(zhì)，如反應(yīng)中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物等，和藥物的結(jié)構(gòu)相近，與某些試劑的反應(yīng)也相同或相近，必須分離執(zhí)業(yè)醫(yī)師后再檢查。

1、薄層色譜法

（1)雜質(zhì)對照品法：適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品的情況。

　　判斷：供試品中所含雜質(zhì)的斑點(diǎn)，不得超過相應(yīng)雜質(zhì)的對照斑點(diǎn)。

　　如鹽酸左旋咪唑中的雜質(zhì)檢查。

（2)供試品自身對照法：適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定，或無雜質(zhì)對照品的情況。

判斷：供試品溶液中所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得深于對照溶液所顯主斑點(diǎn)顏色（或熒光強(qiáng)度)。

如雙氫青蒿素中有關(guān)物質(zhì)檢查的方法。

（3)對照藥物法：當(dāng)無適合的雜質(zhì)對照品，尤其是供試品顯示的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色有差異，難以判斷限量時(shí)，可用與供試品相同的藥物作為對照品，此對照藥物中所含待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。

此處做了PPT，通過 其講解更易理解 。

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

判斷：供試品如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于對照藥物中雜質(zhì)斑點(diǎn)，顏色也不得更深。

如氫溴酸加蘭他敏中的其它生物堿檢查。

2、紙色譜法　通常用于極性較大物質(zhì)的分離、分析。有時(shí)也用于檢查放射性藥物注射液（或溶液)中的放射化學(xué)雜質(zhì)。

如地高辛中有關(guān)物質(zhì)檢查。

3、高效液相色譜法　

（1)峰面積歸一化法：常用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)。

判斷：各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積（含藥物的峰面積，而不含溶劑峰面積)的百分率，不得超過限量。

如利巴韋林中有關(guān)物質(zhì)的檢查。

（2)不加校正因子的主成分自身對照法：用于沒有雜質(zhì)對照品時(shí)雜質(zhì)的限量檢查。

如甲硝唑中2－甲基－5－硝基咪唑的檢查。

（3)加校正因子的主成分自身對照法：用于有雜質(zhì)對照品時(shí)雜質(zhì)的含量測定。

Ax為供試品溶液中雜質(zhì)的峰面積，Cx為雜質(zhì)的濃度，f為校正因子，為藥物對照品的峰面積，為藥物對照品的濃度。

As為藥物對照品的峰面積；AR為雜質(zhì)的峰面積；Cs為藥物對照品的濃度；CR為雜質(zhì)的濃度。

（4)內(nèi)標(biāo)法加校正因子測定供試品中雜質(zhì)的含量：用于有雜質(zhì)對照品時(shí)，雜質(zhì)的含量測定。

Ax為供試品溶液中雜質(zhì)的峰面積，Cx為雜質(zhì)的濃度，f為校正因子，Ai為內(nèi)標(biāo)的峰面積，Ci為內(nèi)標(biāo)的濃度

（5)外標(biāo)法測定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分的含量：用于有雜質(zhì)對照品或雜質(zhì)對照品易制備的情況。

4、氣相色譜法　　檢查揮發(fā)性特殊雜質(zhì)。

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

二、利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異

（一)酸堿性的差異

若雜質(zhì)具有酸、堿性，可采用如下方法檢查

  1、規(guī)定消耗滴定液的體積

    3、指示劑法

若藥物與雜質(zhì)酸堿性不同，可以通過提取方式，分離藥物及雜質(zhì)，再進(jìn)行檢查。

（二)氧化還原性的差異

利用藥物與雜質(zhì)之間的氧化還原電位的差異進(jìn)行檢查

（三)雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀

利用藥物中存在的雜質(zhì)能與一定試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)檢查雜質(zhì)。大多利用反應(yīng)的檢測限來控制雜質(zhì)。

（四)雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色

根據(jù)限量要求，規(guī)定：一定反應(yīng)條件下不得產(chǎn)生某種顏色；或供試品在相同條件下呈現(xiàn)的顏色不得超過雜質(zhì)對照品相應(yīng)顏色；或供試品在一定的條件下的吸收度不得過一定值。

問題討論(5min)；

作業(yè)和習(xí)題布置2(min)；

歸納總結(jié)(3min)

小 結(jié)

本章主要內(nèi)容包括三部分： 1.(1)藥物純度的概念與要求；(2).雜質(zhì)的來源與種類；(3)雜質(zhì)的限度檢查與限量計(jì)算。2.一般雜質(zhì)的檢查方法：如：(1) 氯化物檢查法,(2)硫酸鹽檢查法,(3)鐵鹽檢查法,(4)重金屬檢查,(5)砷鹽檢查法等法。3.特殊雜質(zhì)檢查法。

要掌握一般雜質(zhì)與特殊雜質(zhì)的概念、氯化物、重金屬、砷鹽等雜質(zhì)檢查的原理。熟悉藥品中雜質(zhì)的來源，雜質(zhì)檢查的原理和方法、雜質(zhì)限度檢查與限量計(jì)算。

復(fù)習(xí)思考題

或

作 業(yè) 題

1.雜質(zhì)來源包括哪些類？來源有哪些？

2.重金屬檢查法有哪些？

3.砷鹽檢查法有哪些？各種方法的原理是什么？

教 學(xué) 效 果

與 分 析

多媒體教學(xué)和板書相結(jié)合，并結(jié)合一定的實(shí)例，加深學(xué)生對知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)和了解。特別是通過問題討論，讓大家對所學(xué)知識(shí)進(jìn)行回顧、討論，建立一個(gè)互動(dòng)的教學(xué)氛圍。效果較好。