隨著血細(xì)胞分析儀越來越多的選擇，同一實(shí)驗(yàn)室可能存在不同品牌的血細(xì)胞分析儀，由于各廠家采用的技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)均有一定的差異，因此為保證實(shí)驗(yàn)內(nèi)部不同品牌的血細(xì)胞分析儀具有統(tǒng)一性，建立一套完善的校準(zhǔn)與醫(yī)生招聘網(wǎng)室內(nèi)質(zhì)控系統(tǒng)是一個(gè)重要的手段。
1.材料與方法
1．1 儀器和試劑 ①美國貝克曼庫爾特LH750全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑；② 美國雅培CD1700全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑；③ 美國貝克曼庫爾特公司的S—Cal校準(zhǔn)品及定值質(zhì)控品。
1．2 新鮮全血校準(zhǔn)品取同血型的常規(guī)體檢的健康人的混合新鮮全血14毫升(EDTA-K 抗凝)，先在顯微鏡下觀察細(xì)胞均散在分布，在貝克曼庫爾特LH750全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀上檢測(cè)無任何警示，且結(jié)果均在正常人的結(jié)果范圍之內(nèi)。然后將其分裝至三個(gè)無抗凝劑的試管中，其中第一管8毫升，其它兩管各3毫升。在2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
1．3 儀器準(zhǔn)備
1．3．1 美國貝克曼庫爾特公司工程師對(duì)LH750全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行全面保養(yǎng)及校準(zhǔn)，校準(zhǔn)后各參數(shù)CV值及定值質(zhì)控均在允許范圍之內(nèi)，實(shí)驗(yàn)在校準(zhǔn)當(dāng)天進(jìn)行。
1．3．2 美國雅培公司工程師對(duì)CD1700全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行全面保養(yǎng)，各參數(shù)CV值均在允許范圍之內(nèi)，實(shí)驗(yàn)在校準(zhǔn)后第52天進(jìn)行，進(jìn)行前對(duì)儀器進(jìn)行常規(guī)保養(yǎng)。
1．4 校準(zhǔn)質(zhì)控判定標(biāo)準(zhǔn)
1．4．1 校準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)關(guān)于血液分析儀校準(zhǔn)規(guī)范化的建議要求來判斷(見表1)，各項(xiàng)目參數(shù)均值與定值的差異全部等于或小于表中的第一列數(shù)值時(shí)，儀器不需進(jìn)行調(diào)整，記錄檢測(cè)數(shù)據(jù)即可；若各參數(shù)均值與定值的差異大于表中的第二列數(shù)值時(shí)，不要對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整，需請(qǐng)維修人員核查原因并進(jìn)行處理；若各參數(shù)均值與定值的差異在表中第一列與第二列數(shù)值之間時(shí)，需對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整 。
1．4．2 失控判斷標(biāo)準(zhǔn)：以1988年美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案(CLIA’88)允許誤差范圍的1／4來確認(rèn)兩臺(tái)細(xì)胞分析儀的精密度及偏差室內(nèi)質(zhì)控。CLIA’88允許誤差范圍：白細(xì)胞(WBC)為15%，紅細(xì)胞(RBC)為6% ，血紅蛋白(HGB)為7%，血小板(PLT)為25%，平均紅細(xì)胞體積(MCV)為6％。
1．5 溯源目標(biāo)系統(tǒng)確定 以貝克曼庫爾特LH750全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀為參考儀器(此儀器參加廣東省室間質(zhì)評(píng)評(píng)比為優(yōu)秀，且每年參加貝克曼庫爾特全球質(zhì)控，可溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)參考方法)。
1．6 操作步驟 ① 取第1管，在LH750血細(xì)胞分析儀上嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程連續(xù)檢測(cè)l1次，計(jì)算第2～l1次檢測(cè)結(jié)果的均值(x靶1)、標(biāo)準(zhǔn)差(s1)及變異系數(shù)(CV1)，以此均值為混合新鮮全血的定值(x1)。② 取第2管，在CD1700血細(xì)胞分析儀上嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程連續(xù)檢測(cè)l1次，計(jì)算第2～11次檢測(cè)結(jié)果的均值(x靶2)、標(biāo)準(zhǔn)差(s2)及變異系數(shù)(CV2)。③ 根據(jù)公式，計(jì)算出WBC，RBC，HGB，PLT及MCV的偏差，以這些參數(shù)的偏差和CLIA’8允許誤差的1／4比較，決定是否需要對(duì)CD1700血細(xì)胞分析儀某參數(shù)進(jìn)行調(diào)整[]。④調(diào)整后，取第3管，在CD1700血細(xì)胞分析儀上嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程連續(xù)檢測(cè)l1次，計(jì)算第2～l1次檢測(cè)結(jié)果的均值(x3)再計(jì)算偏差，觀察偏差是否在CLIA’88允許誤差的1／4范圍內(nèi)，如不在此范圍，再繼續(xù)調(diào)整。⑤ 以校準(zhǔn)的偏差作為CD1700比對(duì)室內(nèi)質(zhì)控的靶值，以CLIA’88允許范圍的1／4作為CV值，每日選擇一個(gè)正常標(biāo)本進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)，按以上方法進(jìn)行計(jì)算出偏差，并以此偏差進(jìn)行比對(duì)室內(nèi)質(zhì)控圖繪制，觀察CD1700每日是否存在偶然誤差或系統(tǒng)誤差，如存在系統(tǒng)誤差應(yīng)重新進(jìn)行以上比對(duì)試驗(yàn)，如存在偶然誤差應(yīng)及時(shí)查找原因，并進(jìn)行必要處理。
2.結(jié)果
2．1 貝克曼庫爾特LH750血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)后精密度、準(zhǔn)確度均在廠家允許范圍之內(nèi)，結(jié)果見表2。
2．2 兩臺(tái)血細(xì)胞分析儀各參數(shù)均值經(jīng)公式計(jì)算出偏差，我們發(fā)現(xiàn)HGB，PLT偏差小于中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)校準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn)表中的第一列數(shù)值，WBC，RBC和MCV均在表中第一列與第二列數(shù)值之間時(shí)，因此需對(duì)WBC，RBC和MCV
進(jìn)行校準(zhǔn)，經(jīng)校準(zhǔn)后CD1700的WBC，RBC和MCV偏差均小于表中的第一列數(shù)值，結(jié)果見表3(各項(xiàng)目單位同表2)。
2．3 當(dāng)月CD1700各參數(shù)比對(duì)室內(nèi)質(zhì)控的平均值與執(zhí)業(yè)護(hù)士網(wǎng)靶值較接近，變異系數(shù)均在CLIA’88允許誤差的1／4范圍之內(nèi)，比對(duì)室內(nèi)質(zhì)控統(tǒng)計(jì)見表4(各項(xiàng)目單位同表2)。
3.討論
血細(xì)胞分析儀的廣泛應(yīng)用顯著地提高了血細(xì)胞及相關(guān)參數(shù)檢測(cè)的精密度，由于不同的血細(xì)胞分析儀生產(chǎn)廠家各自使用的測(cè)定原理和方法不盡相同，使得測(cè)定結(jié)果及參考范圍有所差異；同時(shí)，在國內(nèi)、外眾多的大、中型醫(yī)院中，同一實(shí)驗(yàn)室擁有不同品牌、不同型號(hào)的血細(xì)胞分析儀已成為較普遍的現(xiàn)象，致使在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)同一標(biāo)本在不同儀器上分析，可能出現(xiàn)測(cè)定值的偏差，給評(píng)估和解釋結(jié)果以及給臨床上依賴的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)帶來困難。因此有賴其校準(zhǔn)的溯源體系的建立，保證校準(zhǔn)品的定值溯源至參考方法，既可使檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，又可使不同檢測(cè)原理的分析儀在不同時(shí)間、地點(diǎn)得出的檢測(cè)結(jié)果具有可比性。ICSH 推薦參考方法為溯源鏈最高等級(jí)的參考檢測(cè)方法，貝克曼庫爾特使用參考方法對(duì)其校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)品(新鮮全血)進(jìn)行定值，定值后的校準(zhǔn)品對(duì)其選擇的系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)后的檢測(cè)系統(tǒng)再對(duì)廠家的產(chǎn)品校準(zhǔn)品進(jìn)行定值，定值后的工作校準(zhǔn)品再校準(zhǔn)廠家的終端用戶儀器，校準(zhǔn)后的儀器再繼續(xù)對(duì)新鮮全血定值，定值的新鮮全血再對(duì)其它型號(hào)的血細(xì)胞自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)。這樣，被校準(zhǔn)的兩種血細(xì)胞自動(dòng)分析儀均具有同一溯源性。
新鮮全血是最佳的比對(duì)試驗(yàn)標(biāo)本及校準(zhǔn)物，確立實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)參比儀器，再建立新鮮全血在多臺(tái)儀器問的比對(duì)及校準(zhǔn)體系在擁有多臺(tái)不同品牌、不同型號(hào)的血細(xì)胞分析儀的大、中型醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室，不失為一種簡便、經(jīng)濟(jì)的措施，每日進(jìn)行比對(duì)室內(nèi)質(zhì)控并進(jìn)行總結(jié)分析便于發(fā)現(xiàn)兩臺(tái)血細(xì)胞分析儀的偶然誤差、系統(tǒng)誤差，通過總結(jié)分析可評(píng)價(jià)儀器狀態(tài)及或系統(tǒng)傾向，通過校準(zhǔn)可使結(jié)果達(dá)到統(tǒng)。因此，通過本實(shí)驗(yàn)室的實(shí)踐，我們認(rèn)為此系統(tǒng)的建立和實(shí)施方案是行之有效的。
