一、對(duì)角質(zhì)層抗原與角質(zhì)層自身抗體、角蛋白抗原的研究
角朊細(xì)胞從上到下可分為角化（質(zhì))層、粒層和基底層。角質(zhì)層位于表皮外層，是一種特殊的結(jié)構(gòu)，由許多已角化的扁平細(xì)胞組成。電鏡下僅見增厚的胞膜和緊密排列的張力微絲。角質(zhì)層很少或根本不與免疫系統(tǒng)相通。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)表明，所有正常人血中都含有低滴度的抗角質(zhì)層自身抗體，免疫熒光呈局灶狀或顆粒狀分布于角質(zhì)層內(nèi)。在體外，角質(zhì)層抗體與其產(chǎn)生者自身的角質(zhì)層發(fā)生反應(yīng)，因而證明是自身抗體，但在正常人體內(nèi)不發(fā)生反應(yīng)。下列兩種情況可使其在體內(nèi)與角質(zhì)層發(fā)生反應(yīng)：①外傷；②銀屑病鱗屑內(nèi)。銀屑病人血清中的抗角質(zhì)層自身抗體與正常人無差別，但在銀屑病的鱗屑浸出物中發(fā)現(xiàn)有Ig。這種抗體是能與補(bǔ)體結(jié)合的IgG和IgM型抗體。
角質(zhì)層抗原與角化細(xì)胞的細(xì)胞膜或/和細(xì)胞間質(zhì)有關(guān)，近年來通過對(duì)角蛋白多肽的研究發(fā)現(xiàn)至少一些角質(zhì)層的自身抗體是針對(duì)角蛋白的。
抗角質(zhì)層自身抗體的應(yīng)用：抗角質(zhì)層自身抗體存在于正常人血清中，但并不引起疾病。該種抗體可能對(duì)于清除損傷了的表皮細(xì)胞有一定的作用，銀屑病中角朊細(xì)胞的過度增生可能與這種抗體的沉積有關(guān)。與抗角質(zhì)層自身抗體有關(guān)的疾病尚有類風(fēng)濕關(guān)節(jié) 炎、關(guān)節(jié) 病型銀屑病、外傷等。
制備的抗角蛋白抗體：近10年來，應(yīng)用免疫動(dòng)物的方法制備了多種抗角蛋白多抗或單抗，可以針對(duì)不同分子量的角蛋白成分。角蛋白是上皮細(xì)胞的中間絲成份，抗角蛋白抗體可以作為上皮組織和由上皮組織起源的腫瘤的有用標(biāo)記之一。
二、對(duì)天皰瘡的研究
天皰瘡是一類自身免疫性疾病，其臨床特點(diǎn)為皮膚和粘膜的自發(fā)性的、松弛性的水皰形成，病理特點(diǎn)是由棘層松解引起的表皮內(nèi)水皰。臨床上可分為尋常型（PV)、紅斑型、落葉型（PE)、增殖型、皰疹樣型五型。
1．免疫熒光檢查 應(yīng)用IIF檢查，天皰瘡病人中85%～90%血清中有抗表皮棘細(xì)胞間抗體（Pab)存在，活動(dòng)期更高。血清中Pab滴度與病情嚴(yán)重程度相平行。免疫熒光圖形是棘細(xì)胞間均一的線型。作IIF檢查時(shí)，底物很重要。Michael等比較猴食道及豚鼠食道上皮作為PV和PF的底物情況，發(fā)現(xiàn)PV以猴食道上皮作底物較好，而PF則以豚鼠食道上皮作底物較好。唐書謙等認(rèn)為作IIF時(shí)首選人表皮和猴食道上皮，而小白鼠食道及大白鼠舌粘膜亦可作為一般常用的底物。我們的經(jīng)驗(yàn)是，-20℃保存1年的冰凍人包皮切片作底物時(shí)，其抗原性無明顯減弱，但時(shí)間過長(zhǎng)，則要影響其滴度；冰凍切片后的皮膚暴露于室溫（20℃±)3h即可完全破壞其抗原。
取天皰瘡皮損周圍皮膚作DIF，對(duì)天皰瘡的診斷更有意義。如天皰瘡的皮損廣泛，也可取外觀“正常”的皮膚，而不一定要取皮損邊緣的皮膚，但皮損邊緣的皮膚熒光抗體稀釋度較“正�！逼つw者為高。
2．免疫熒光顯示的部位 在PV中，免疫球蛋白附著的部位一般在基底細(xì)胞上棘細(xì)胞下層；而在PF中，免疫球蛋白附著的部位在較上層的棘細(xì)胞間。與Pab結(jié)合的天皰瘡抗原位于表皮細(xì)胞表面，其細(xì)胞間的熒光是細(xì)胞表面熒光的延伸。免疫電鏡證明天皰瘡抗原可能與橋粒列明顯關(guān)系。醫(yī)學(xué).全在線zxtf.net.cn
除用免疫熒光法可證明有Pab存在外，目前也用酶標(biāo)法、ABC法等。
天皰瘡抗體主要為IgG，也有部分為IgM和IgA。應(yīng)用DIF檢查時(shí)，也發(fā)現(xiàn)有C3沉積，但目前認(rèn)為可能是繼發(fā)于Ig的沉積。
3．天皰瘡抗體與天皰瘡的關(guān)系可由以下幾方面來證明①DIF證明天皰瘡病人皮損周圍及“正�！逼つw處有IgG的沉積，且其熒光強(qiáng)度與病情的嚴(yán)重程度相平行；②血清中的Pab滴度與病情的嚴(yán)重程度相平行；③進(jìn)行皮膚器官培養(yǎng)時(shí)，加入純化的Pab可導(dǎo)致天皰瘡樣的棘層松解；④用血漿交換法去除Pab可導(dǎo)致天皰瘡的緩解。
天皰瘡抗體是針對(duì)表皮細(xì)胞膜多糖萼的抗體，其在體內(nèi)與表皮細(xì)胞膜結(jié)合后可能使表皮細(xì)胞釋放蛋白溶解酶如u –PA,u-PA在天皰瘡發(fā)病機(jī)理中的作用：1)角朊細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入Pab后，上清液中u-Pa ↑；2)抗u-PA抗體可阻止棘層松解發(fā)生；3)u-PA的抑制劑如α2-巨球蛋白、STBI以及合成抑制劑Foy、Foy-305、FUT-175、止血芳酸等均能在一定程度上抑制Pab導(dǎo)致棘層松解的產(chǎn)生。
4．天皰瘡樣抗體與血型抗體 Ahmed及Workman檢查1500份正常血清，發(fā)現(xiàn)14例有低滴度的抗表皮細(xì)胞間抗體，但無天皰瘡的臨床表現(xiàn)，其中9例用A、B型血型物質(zhì)吸收后熒光消失，說明其可能為A、B血型抗體，A、B、H血型抗體存在于正常皮膚和口腔粘膜的棘層和顆粒層，但不存在于基底層和角化層，其分布同天皰瘡抗原。藥疹、燒傷等可有天皰瘡樣抗體，其與Pab的區(qū)別在于前者稀釋度較低，熒光染色圖形為粗顆粒狀、不均一，且部分可用A、B血型物質(zhì)吸收，而Pab的熒光圖型為連續(xù)均一的線型，用A、B血型物質(zhì)吸收后滴度不變。
