| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1546168A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2004.11.17 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200310115937.5 |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.12.16 |
| 專利名稱 | 脂質(zhì)體內(nèi)皮抑素的制備方法 |
| 主分類號(hào) | A61K38/17 |
| 分類號(hào) | A61K38/17;A61K47/24;A61K9/12;A61P35/00 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王群 |
| 地址 | 130022吉林省長(zhǎng)春市人民大街5625號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國(guó)省代碼 | 吉林;22 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種脂質(zhì)體內(nèi)皮抑素的制備方法，將溶于氯仿的磷脂酰膽堿、膽固醇、磷脂酰絲氨酸和硬脂酸胺按摩爾比為15～20∶15～20∶2～5∶0.5～1.5混合，在36～40℃下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)4～6h，旋轉(zhuǎn)速度為80～120rpm，形成一薄層脂膜，以氮?dú)饬鞒M殘余痕量有機(jī)溶劑，加入2mLH2O繼續(xù)以120rpm旋轉(zhuǎn)溶解下脂膜，在20～25℃下浴式超聲10～15min，形成多囊脂質(zhì)體，室溫下靜置孵育1～2h，冰浴下進(jìn)行探針超聲，6～10×0.5min，每次間隔0.5～1min，懸液靜置孵育2～3h，8000rpm離心10min，取上清液小單層脂質(zhì)體，以0.22μm膜除菌過(guò)濾后，同4mg/mL內(nèi)皮抑素溶液等體積混合，內(nèi)皮抑素是通過(guò)基因工程方法在大腸桿菌中表達(dá)并經(jīng)Ni-NTASepharose親和層析柱純化的重組人內(nèi)皮抑素蛋白，加入脂質(zhì)體凍干保護(hù)劑，凍干保護(hù)劑為6～8％海藻糖、0.6～0.8％明膠、0.5-1％人血清白蛋白、1.5～2％山梨醇、1％谷氨酸鈉、1％尿素、0.5％抗壞血酸和0.2％L-精氨酸，在-45℃冷凍干燥8～10h，收獲內(nèi)皮抑素脂質(zhì)體。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于脂質(zhì)體內(nèi)皮抑素的制備方法。結(jié)合旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和冷凍干燥方法制備的內(nèi)皮抑素脂質(zhì)體粒徑大小在150nm～180nm，蛋白包裹率是35～42％。在凍干狀態(tài)下，內(nèi)皮抑素脂質(zhì)體在-20℃可以保存12個(gè)月，在4～8℃可以保存6個(gè)月，在20～25℃可以保存2個(gè)月。在內(nèi)皮抑素脂質(zhì)體重新水合形成膠體溶液時(shí)，在4～8℃穩(wěn)定期為6d，在20～25℃穩(wěn)定期為60h。該脂質(zhì)體具有穩(wěn)定性好、蛋白包裹率高、粒徑大小均勻、操作簡(jiǎn)單、適合工業(yè)化大批量生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。 |
| 國(guó)際公布 |
