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新型重組人組織因子途徑抑制物活性肽及其制備方法

公開(公告)號(hào) CN1176943C  
公開(公告)日 2004.11.24  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN01126949.9  
申請(qǐng)日期 2001.10.08  
專利名稱 新型重組人組織因子途徑抑制物活性肽及其制備方法  
主分類號(hào) C07K14/435  
分類號(hào) C07K14/435;C12N15/09;C12P21/02;A61K38/17;A61P7/02  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 復(fù)旦大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 馬端;宋后燕  
地址 200032 上海市醫(yī)學(xué)院路138號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海正旦專利代理有限公司  
代理人 吳桂琴  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 新型重組人組織因子途徑抑制物活性肽,其特征在于改變?nèi)私M織因子途徑抑制物結(jié)構(gòu)域1和結(jié)構(gòu)域2的結(jié)構(gòu),獲得保持hTFPI特異、高效抗組織因子(TF/FVIIa)的活性肽1和抗FXa活性的活性肽2,活性肽1 rhTFPI-AP1具有SEQ ID NO:1的基酸序列,活性肽2 rhTFPI-AP2具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列。  
摘要 本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及具有抗凝和抗栓活性的重組人組織因子途徑抑制物活性肽的制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明根據(jù)對(duì)全長(zhǎng)組織因子途徑抑制物的結(jié)構(gòu)及其生化特性的分析,設(shè)計(jì)了新型rhTFPI-AP1和rhTFPI-AP2結(jié)構(gòu)。將突變后組織因子途徑抑制物結(jié)構(gòu)域1和結(jié)構(gòu)域2基因與真核表達(dá)載體pPIC9K重組,轉(zhuǎn)化甲醇營(yíng)養(yǎng)型酵母GS115,篩選高表達(dá)工程菌。工程菌經(jīng)發(fā)酵擴(kuò)增,離心收集上清液,經(jīng)三步法純化rhTFPI-AP1和rhTFPI-AP2。所得產(chǎn)品凍干后,具有抗凝和抗栓活性,對(duì)于預(yù)防血栓性疾病的發(fā)生有明顯的作用。  
國(guó)際公布  
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