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抗醛糖還原酶相似蛋白單克隆抗體的制備與鑒定方法

公開(公告)號(hào) CN1544636A  
公開(公告)日 2004.11.10  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200310106354.6  
申請(qǐng)日期 2003.11.19  
專利名稱 抗醛糖還原酶相似蛋白單克隆抗體的制備與鑒定方法  
主分類號(hào) C12N15/53  
分類號(hào) C12N15/53;C12P21/08;G01N33/577  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 東南大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 謝維;金俊飛;張建瓊;單軍  
地址 210096江蘇省南京市四牌樓2號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司  
代理人 沈廉  
國(guó)省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一種抗醛糖還原酶相似蛋白單克隆抗體的制備方法,其特征在于采用基因重組的方法表達(dá)醛糖還原酶相似蛋白-谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(ARL-GST)重組蛋白并將其純化;將醛糖還原酶相似蛋白-谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(ARL-GST)免疫小制備脾細(xì)胞懸液,在聚乙二醇(PEG)作用下與處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Sp2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,經(jīng)過雜交瘤抗體檢測(cè)與數(shù)次克隆,得到穩(wěn)定分泌抗ARL-1單克隆抗體的一株細(xì)胞。  
摘要 抗醛糖還原酶相似蛋白單克隆抗體的制備與鑒定方法,屬于生物工程開發(fā)新型肝癌診斷試劑的技術(shù)領(lǐng)域。其制備的方法是采用基因重組的方法表達(dá)、純化ARL-GST重組蛋白,將ARL-GST免疫小鼠制備脾細(xì)胞懸液,在聚乙二醇作用下與處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Sp2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,經(jīng)過雜交瘤抗體檢測(cè)與數(shù)次克隆,得到穩(wěn)定分泌抗ARL-1單克隆抗體的一株細(xì)胞,命名為F9。經(jīng)測(cè)定F9分泌的抗ARL-1單克隆抗體屬IgG2b亞型,輕鏈為κ型,其腹水效價(jià)為1∶4×10-5。經(jīng)鑒定F9分泌的單克隆抗體只對(duì)ARL-1蛋白反應(yīng),而對(duì)與ARL-1蛋白具有較高同源性的醛糖還原酶都不起作用,說明上述單克隆抗體是特異性抗ARL-1蛋白的。  
國(guó)際公布  
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