方法名稱： |
龍葵藥材-甾體類生物總堿含量測定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于龍葵藥材甾體類生物總堿含量測定 |
方法原理： |
本品加乙醇回流提取，經(jīng)液相色譜分離，在210 nm處測定峰面積，外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器 液相- 質(zhì)譜聯(lián)用儀（SHIMADZU 2010A LC-MS)，SPD-PDA檢測器（日本島津有限公司)，澳洲茄胺標(biāo)準(zhǔn)品（北京豐斯特公司) 色譜條件 色譜柱：漢邦C18柱；流動相：乙腈/水（55：45，水相pH值用磷酸調(diào)節(jié)至2.7)；流速：1.2ml/min；檢測波長：210 nm |
試樣制備： |
對照品溶液制備 無。 供試品溶液制備 1)龍葵甾體類生物總堿的提�。悍蛛x稱取龍葵樣品，采用V[c（HCl)=2 mol/L]：V（乙醇)=1：4溶液潤濕24 h后，料液比按1 g：10 mL加入乙醇，在65 ℃的溫度下醇提兩次，每次4 h。過濾后合并濾液，濾液經(jīng)減壓蒸餾后得到黃綠色固體。用0.5 mol/L的HCl溶解后，用氯仿萃取三次，去氯仿層。水相用NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH為10.5，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干后用甲醇溶解并定容至50 mL，得到龍葵甾體類生物總堿的甲醇溶液。2)苷元澳洲茄胺的提�。簩⒑摅w類生物總堿的甲醇溶液定量取出并減壓蒸干后，殘留物用40 mL V[c（HCl)=2 mol/L]：V（乙醇)=1：1溶液溶解，在100 ℃的溫度下水解，水解后將溶液中乙醇蒸餾去除，余液用氯仿萃取三次，取酸水層。經(jīng)NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH為10.5后，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干并用甲醇溶解，定容至50 mL，得到澳洲茄胺的甲醇溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取澳洲茄胺對照液以及龍葵供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算澳洲茄胺含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻： |
蔣新宇，楊輝，趙宇.龍葵中甾體類生物總堿的含量測定. 食品科學(xué).2006，27（08)：224～226 |
