血細胞分析在儀器處于正常工作狀態(tài)下, 血細胞計數(shù)結(jié)果的準確性取決于樣品的質(zhì)量。現(xiàn)就血細胞分析樣品質(zhì)量的控制談幾點個人經(jīng)驗。
1．樣品采集中的控制點
1．1 靜脈血樣品, 不應(yīng)在輸液、輸血同側(cè)肢體上采血。要防止血標本的溶血, 特別是在血液注入容器中不能垂直射入,而應(yīng)沿試管壁流入,以免產(chǎn)生大量氣泡而造成標本溶血。采血完畢, 使血液立即與國家醫(yī)學網(wǎng)EDTA·2K2抗凝劑混勻, 即將盛血容器輕輕來回顛倒8次進行初始混勻。目的是抑制血小板的聚集,防止血小板發(fā)生不可逆性的聚集而使血液凝固;皮膚血樣品(曾稱為毛細血管血),其采血的整個操作過程中動作要迅速。血液從針刺部位自然流出最佳,混有組織液的第1 滴血棄去。血液流出不暢, 切勿用力擠壓, 以免造成組織液混入。血入一次性容器(下稱子彈頭),血液應(yīng)立即與EDTA·2K2結(jié)晶抗凝劑進行初始混勻, 即將盛血容器先甩三次,然后子彈頭朝上,用手指輕輕彈擊尖部側(cè)面三次,再將子彈頭向下甩三次。用同樣彈擊、甩的方式和次數(shù),再顛倒二遍混勻。
1．2 血液采集后的其它非顛倒混勻方式,如隨便震搖、旋轉(zhuǎn)、彈擊和點敲(子彈頭)數(shù)次,被抑制聚集的血小板解離不充分,會導(dǎo)致白細胞和血小板計數(shù)呈假性升高和降低, 或血液與抗凝劑混勻不充分易發(fā)生血液凝固;不能圖省事, 直接從剛采集到的未抗凝的靜脈血從其容器中轉(zhuǎn)移到做血細胞分析的抗凝容器里,否則易造成肉眼看不見的血凝塊,而影響血細胞計數(shù)的準確性。
1．3 皮膚血樣品的盛血容器, 子彈頭容量為1.5mL的最佳。筆者實驗證實,使用0.5mL的子彈頭,樣品采集后及時檢測,所有的白細胞和血小板檢測結(jié)果均呈假性升高和降低;若放置10 min后測定,其結(jié)果與1.5 mL容量的子彈頭立即檢測無差異顯著性。其原因可能為在容量小的容器中被抑制聚集的血小板因時效短不容易均勻地分布在容器中,故用1.5 mL容量的子彈頭為宜。
2 樣品分析中的控制點
2.1 正確采集血液是獲得準確、可靠實驗結(jié)果的重要一環(huán),而樣品進入儀器分析,則是實驗室的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。因此,實驗室的操作者必須是專業(yè)素質(zhì)高、負責任的技術(shù)人員。
2.2 樣品進入儀器分析前, 應(yīng)對樣品再次混勻。目的是使可逆性聚集的血小板團分散成單個血小板,使其它血細胞分布均勻。樣品再次混勻方式:靜脈血,將盛血容器夾在兩手掌心來回搓動8 次,用同樣方式和搓動次數(shù),將容器顛倒二遍搓動;皮膚血再次混勻同初始混勻方式。
2.3 靜脈血樣品及時或不能及時上機分析均應(yīng)再次混勻。皮膚血樣品及時分析只要初始混勻即可上機分析,如不能及時檢測,當樣品要分析時,應(yīng)再次按初始混勻方式混勻樣品。
3 樣品分析后的控制點
3.1 樣品進入實驗室,一眼就能識別的不合格血樣就被拒收。但那些肉眼察覺不到的有核紅細胞、紅細胞碎片、血小板的“聚集”等影響實驗結(jié)果的血樣,可通過樣品分析后,從直方圖(以下直方圖的文字描述, 為庫爾特Ac T diff2 血細胞分析儀的圖像特征)和測定數(shù)據(jù)旁的警告符號*來判斷分析樣品的質(zhì)量。
3.2 因采血不順利, 或采血后未立即進行初始混勻,易發(fā)生血小板不可逆性的微凝聚集, 如血細胞計數(shù)和血紅蛋白測定結(jié)果與臨床明顯不符,應(yīng)重新采集血樣;由血小板可逆性聚集所致,白細胞直方圖在三個峰前出現(xiàn)小峰(左邊曲線與縱坐標相交),血小板直方圖無電子擬合線,儀器有警告提示。通常情況下,當混勻樣品時,沒有充分將可逆性聚集的血小板團分散成單個血小板,儀器將那些未分散的血小板團誤認為小白細胞而計入白細胞數(shù)中;在血小板計數(shù)時,若團塊大于儀器預(yù)設(shè)的脈沖值,將不被儀器計入,或幾個血小板當一個計入,致使影響白細胞和血小板計數(shù)的準確性。但紅細胞計數(shù),血紅蛋白測定不受影響。遇此情況,可將樣品放置10 min后重新混勻樣品再測,若直方圖正常,警告符號消失,可發(fā)出報告單,如仍呈現(xiàn)異常直方圖,并伴有警告*提示,應(yīng)考慮其它原因所致,如溶血標本,因紅細胞碎片大小不一,血小板直方圖擬合線形成階梯狀
,造成血小板計數(shù)呈假性升高。重采血樣分析,或用手工法復(fù)檢。
3.3 由血小板可逆性聚集所致,呈現(xiàn)的假性白細胞計數(shù)增加和血小板假性減少,其它原因所致的結(jié)果異常,應(yīng)引起操作者的足夠重視,不要因樣品的質(zhì)量或人為的誤差而誤導(dǎo)臨床診斷和治療。
總之,正確的樣品采集、混勻是控制血細胞分析樣品質(zhì)量的關(guān)鍵,借助直方圖和儀器旗標的提示,對實驗樣品是否可靠起著重要的監(jiān)控作用。
