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血脂檢測(cè)試劑對(duì)總膽汁酸測(cè)定的交叉污染

血脂檢測(cè)試劑對(duì)總膽汁酸測(cè)定的交叉污染:全自動(dòng)生化分析儀具有微量、快速、多項(xiàng)、準(zhǔn)確、重復(fù)性好等特點(diǎn)。隨著全自動(dòng)生化分析儀的廣泛應(yīng)用,其測(cè)定過(guò)程中存在的交叉污染問(wèn)題也受到關(guān)注。分析儀使用同一根試劑針吸取試劑,雖然分析儀有清洗系統(tǒng),但試劑針很難通過(guò)一次短暫快速的清洗程序就清洗干凈,一個(gè)項(xiàng)目對(duì)隨后的一個(gè)項(xiàng)目甚至幾個(gè)項(xiàng)目都會(huì)帶來(lái)一定程度的試劑污染,并且隨著儀器使用時(shí)間的增加,試劑交叉污染程度會(huì)有所加劇。在工作中我們發(fā)現(xiàn)測(cè)定血脂后測(cè)定的總膽汁酸(

全自動(dòng)生化分析儀具有微量、快速、多項(xiàng)、準(zhǔn)確、重復(fù)性好等特點(diǎn)。隨著全自動(dòng)生化分析儀的廣泛應(yīng)用,其測(cè)定過(guò)程中存在的交叉污染問(wèn)題也受到關(guān)注。分析儀使用同一根試劑針吸取試劑,雖然分析儀有清洗系統(tǒng),但試劑針很難通過(guò)一次短暫快速的清洗程序就清洗干凈,一個(gè)項(xiàng)目對(duì)隨后的一個(gè)項(xiàng)目甚至幾個(gè)項(xiàng)目都會(huì)帶來(lái)一定程度的試劑污染,并且隨著儀器使用時(shí)間的增加,試劑交叉污染程度會(huì)有所加劇。在工作中我們發(fā)現(xiàn)測(cè)定血脂后測(cè)定的總膽汁酸(TBA),再?gòu)?fù)查時(shí)與醫(yī).學(xué)全在線zxtf.net.cn原來(lái)測(cè)定值有差異,為研究血脂試劑是否都影響TBA測(cè)定,我們實(shí)驗(yàn)觀察了TC,TG,HDL,LDL等試劑,對(duì)TBA是否存在交叉污染的情況進(jìn)行分析,報(bào)告如下。

1.材料與方法

1.1  儀器與試劑  OLYMPUS AU640全自動(dòng)生化分析儀由日本OLYMPUS公司提供,TC,TG,HDL,LDL試劑由日本協(xié)和試劑提供,TBA由日本第一化學(xué)試劑提供。

1.2  測(cè)定方法

1)首先對(duì)儀器進(jìn)行保養(yǎng),對(duì)比色杯、攪拌棒、試劑針進(jìn)行浸泡清洗,以排除儀器本身原因?qū)Y(jié)果的影響。

2)從當(dāng)天送檢標(biāo)本中提取血清,制備混合血清,取10份血清連續(xù)分別檢測(cè)TBA,此組數(shù)據(jù)設(shè)為T(mén)BA。

3)再取50份血清,從1號(hào)到50號(hào)排序,1號(hào)檢測(cè)TC,2,3,4,5號(hào)檢測(cè)TBA;6號(hào)檢測(cè)TC,7,8,9,10號(hào)檢測(cè)TBA;11號(hào)檢測(cè)TC,12,13,14,15號(hào)檢測(cè)TBA;16號(hào)檢測(cè)TC,17,18,19,20號(hào)檢測(cè)TBA;以此類(lèi)推,檢測(cè)到50號(hào)。將2,6,12,16,22,26,32,36,42,46數(shù)據(jù)設(shè)為T(mén)C S1,將3,7,13,17,23,27,33,37,43,47數(shù)據(jù)設(shè)為T(mén)C S2,以此類(lèi)推,得出數(shù)據(jù)TC S3,TC S4。

4)以同樣的方法得出數(shù)據(jù)TG S1~S4,HDL S1~S4,LDL S1~S4。

1.3  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法  采用SPSS軟件,進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)。

2 .結(jié)果

1)TBA與測(cè)定血脂后TBA測(cè)定值比較見(jiàn)表1。

表1  TBA與測(cè)定血脂后TBA測(cè)定值比較(略)

TBA數(shù)據(jù)分別與S1,S2,S3,S4進(jìn)行比較,結(jié)果見(jiàn)表2。在TC,HDL組,TBA與S1,S2,S3比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與S4比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在TG,LDL組,TBA與S1比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與S2,S3,S4比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2)分別取TC,TG,HDL,LDL試劑2各10份,作為標(biāo)本檢測(cè)TBA,結(jié)果見(jiàn)表3。

表2  TBA分別與S1,S2,S3,S4配對(duì)t檢驗(yàn)P值表(略)

表3  血脂試劑2中TBA含量(略)

3.討論

OLYMPUS AU640全自動(dòng)生化分析儀的試劑針要接觸試劑盤(pán)中的各種試劑,每種不同項(xiàng)目間的吸取僅有一次沖洗過(guò)程,如果存在試劑交叉污染,將會(huì)對(duì)分析結(jié)果造成很大影響。由表2中可以看出血脂試劑對(duì)TBA檢測(cè)存在嚴(yán)重的交叉污染(P<0.05)。TC,HDL試劑可以影響TBA三個(gè)測(cè)試,TG,LDL試劑可以影響TBA一個(gè)測(cè)試。試劑間的交叉污染原因是多方面的,主要有三個(gè):第一,試劑成分中含有某種被污染的項(xiàng)目;第二,試劑中含有下一個(gè)測(cè)試所要測(cè)定底物或含有的某種試劑成分,與下一反應(yīng)所測(cè)定的底物有作用,因而直接影響下一反應(yīng)測(cè)定的結(jié)果;第三,該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)給下一個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)進(jìn)程帶來(lái)了間接干擾。從表3看出TC,HDL試劑2中對(duì)TBA正干擾物質(zhì)含量比較高,TG,LDL試劑2中對(duì)正干擾物質(zhì)含量少一些,這與表1交叉污染結(jié)果是一致的。對(duì)于血脂試劑中對(duì)TBA檢測(cè)產(chǎn)生正干擾的物質(zhì)的分析,從試劑成分看,血脂試劑2中均含有過(guò)氧化物酶,但未標(biāo)明其含量,它是否增強(qiáng)了TBA循環(huán)酶反應(yīng),還是有其他物質(zhì)增強(qiáng)了反應(yīng),有待于進(jìn)一步探討。在檢測(cè)中為避免血脂試劑對(duì)TBA檢測(cè)的影響,首先可以更改儀器參數(shù),增加試劑針清洗次數(shù);其次,可以調(diào)整試劑位,在血脂檢測(cè)與TBA測(cè)試之間,加做幾個(gè)對(duì)TBA無(wú)干擾的檢測(cè)項(xiàng)目;還可以運(yùn)用儀器本身的預(yù)防交叉污染程度、TBA反應(yīng)程序控制項(xiàng)目的反應(yīng)次序,先測(cè)試TBA,再測(cè)試血脂。但因?yàn)樵趯?shí)際工作中,標(biāo)本編排次序和項(xiàng)目組合的隨機(jī)性比較大,有時(shí)很難避開(kāi)交叉污染,所以在編排標(biāo)本檢測(cè)順序時(shí),一定要考慮到血脂項(xiàng)目對(duì)
 

TBA的影響。

由于試劑成分的復(fù)雜多樣性,實(shí)時(shí)儀器狀況的獨(dú)特性,可能發(fā)生的試劑間交叉污染的情況不盡相同,要想得到正確可靠的結(jié)果,不但要熟練掌握儀器操作,對(duì)儀器要精心維護(hù)和保養(yǎng),也要了解各反應(yīng)的原理,試劑組成,才能在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)和避免試劑間的交叉污染。


 
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