藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與應(yīng)用

　�。�六)作用于膽堿受體和腎上腺素受體的藥物實(shí)驗(yàn)

　　膽堿受體有M和N兩種，當(dāng)M受體興奮時(shí)，表現(xiàn)為心率減慢，心收縮力減弱，血壓下降，胃腸道平滑肌收縮，瞳孔縮小，唾液分泌增加，支氣管平滑肌收縮等，已知典型的M受體阻滯藥阿托品等能阻滯上述作用。欲確定一個(gè)未知藥是否作用于M膽堿受體，其作用性質(zhì)是興奮、抑制或阻斷，可選離體豚鼠回腸、兔的瞳孔、兔的唾液腺分泌、大鼠或貓的血壓、離體蛙心和離體兔右心房等實(shí)驗(yàn)，與已知藥匹魯卡品或阿托品對(duì)照，即可獲得明確結(jié)論。N-膽堿受體分為N₁和N₂兩種。N₁膽堿受體興奮時(shí)，植物神經(jīng)節(jié)興奮及腎上腺髓質(zhì)分泌。在阿托品化貓，凡不具有血管收縮作用而能使血壓升高的藥物，初步可認(rèn)為其作用部位在N1膽堿受體。N2膽堿受體興奮時(shí)骨骼肌收縮，可采用水蛭背肌或蛙腹直肌標(biāo)本實(shí)驗(yàn)，即能得到結(jié)果。醫(yī)學(xué)全在.線提供

　　二苯羥乙酸奎寧酯（Quinuclidiny1Benzilate,QNB)是一個(gè)M-受體阻滯藥，它能與M-膽堿受體緊密結(jié)合，維持時(shí)間較長(zhǎng)，為研究M-膽堿受體提供了一個(gè)有效的工具。節(jié)后擬膽堿藥或節(jié)后抗膽堿藥都能與M-膽堿受體結(jié)合，因此均可降低³H-QNB的結(jié)合率。常選用豚鼠的回腸作此實(shí)驗(yàn)。此外，還可選用豚鼠的心臟、肺臟、腦及脾臟，這些組織勻漿均具有與³H-QNB結(jié)合的M-膽堿受體。但在肝臟、腎臟及隔肌則不存在與³H-QNB結(jié)合的M受體。

　　腎上腺素受體有α和β兩種，當(dāng)α受體興奮時(shí)，表現(xiàn)為皮膚、粘膜及內(nèi)臟壓管收縮，胃腸道平滑肌松弛，瞳孔散大，瞬膜收縮，子宮收縮等。已知典型的α受體阻滯藥酚妥拉明和妥拉蘇林等能阻斷上述作用。常選用離體兔主動(dòng)脈條、離體豚鼠或大鼠輸精管、離體貓脾條、離體大白鼠胃底條、離體兔空腸等作α受體作用實(shí)驗(yàn)。β受體興奮時(shí)，表現(xiàn)為心率加快，心收縮力加強(qiáng)，傳導(dǎo)加速，骨骼肌血管和冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張，胃腸道平滑機(jī)松弛，支氣管擴(kuò)張，糖原和脂肪分解等。由于β受體又分β₁、β₂兩種，對(duì)于這兩種亞型受體作用的觀察，一般是以心臟效應(yīng)作為觀察β₁受體作用，而以氣管、支氣管效應(yīng)作為觀察β₂受體作用。已知典型的β受體阻滯藥心得安等能阻斷上述作用。常選用離體蛙心、離體原位蛙心排出量、兔心灌注、在位貓（或兔)心實(shí)驗(yàn)、兔（豚鼠)離體心房實(shí)驗(yàn)、離體大白鼠子宮、離體豚鼠氣管片等作β受體作用實(shí)驗(yàn)。

　　未妊娠兔的離體子宮對(duì)α受體興奮藥十分敏感，可使之強(qiáng)烈收縮，故可用于鑒定α受體興奮藥或阻滯藥。脂肪組織存在β受體，凡能興奮β受體的藥物均能引起游離脂肪酸的釋放增加。如預(yù)先加入β受體阻滯藥，則可使游離脂肪酸的釋放量明顯減少，甚至完全阻斷，故此法亦用來鑒定作用于β受體的藥物。常選用不饑餓的雄性大白鼠，麻醉下取其副睪脂肪墊作實(shí)驗(yàn)。子宮平滑肌收縮為α受體興奮反應(yīng)，目前常選用兔子宮平滑肌膜與³H-DHE（即³H-Dihydrocryptne,是一個(gè)α受體阻滯藥)進(jìn)行體外培養(yǎng)，³H-DHE與子宮平滑肌膜上α受體結(jié)合，25℃不超過17分鐘，即能完全達(dá)到結(jié)合，而且結(jié)合穩(wěn)定性較好，至少可維持39分鐘，常用來鑒定α受體。

　�。ㄆ�)骨骼肌松弛藥實(shí)驗(yàn)

　　在進(jìn)行神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥試驗(yàn)研究時(shí)，動(dòng)物品種的選擇是十分重要的，因神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥的效應(yīng)有明顯的動(dòng)物種屬差異，只有選用在反應(yīng)性質(zhì)和程度與人相似的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，所得結(jié)果才對(duì)臨床用藥有較高的參考價(jià)值。

　　不同種動(dòng)物對(duì)同一種神經(jīng)肌接點(diǎn)阻滯藥的反應(yīng)不同，如貓、狗、兔、大白鼠對(duì)十烴季銨和筒箭毒的敏感性各不相同，其間差異見圖10-8、表10-30所示。不同種屬動(dòng)物對(duì)神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥反應(yīng)的差異不僅表現(xiàn)在作用強(qiáng)度上，而且反應(yīng)在作用性質(zhì)上，如貓對(duì)琥珀酰膽堿、十烴季銨的反應(yīng)與人近似，呈單純?nèi)�極化型阻斷作用，而在兔、豚鼠、大白鼠常表現(xiàn)為雙相阻斷作用。雞對(duì)十烴季鋟特別敏感，大白鼠對(duì)筒箭毒敏感，人對(duì)十烴季銨與筒箭毒的反應(yīng)介于貓對(duì)狗之間而與貓近似。雖然蛙、兔、小雞、小白鼠等動(dòng)物在神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥的試驗(yàn)研究上各有應(yīng)用價(jià)值，如蛙可在不用人工呼吸的條件下作用于觀察神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥的作用，小雞可用于區(qū)別去極化型阻斷藥與非去極化型阻斷藥，兔垂頭法可用于觀察神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥的效應(yīng)和鑒定其效價(jià)，小白鼠用于神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥的初篩，但以貓對(duì)神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥的的反應(yīng)與人最近似，故貓是必不可少的試驗(yàn)動(dòng)物，但也不是一切試驗(yàn)均需要在貓身上進(jìn)行。

圖10-3不同種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)十烴季銨和筒箭毒的敏感性

表10-30　一些神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷藥對(duì)人、貓、大白鼠的相對(duì)效價(jià)*

　　 *每格中上面數(shù)字是以筒箭毒用為1m算出的相對(duì)強(qiáng)度。插號(hào)中數(shù)字為產(chǎn)生90-95%神經(jīng)肌接點(diǎn)阻斷作用所需劑量。

三、心血管系統(tǒng)藥理實(shí)驗(yàn)中的選擇與應(yīng)用

　�。ㄒ�)血壓測(cè)量

　　插管直接測(cè)壓法：在研究中經(jīng)常應(yīng)用動(dòng)物急性血壓試驗(yàn)來分析藥物等對(duì)循環(huán)系統(tǒng)的影響，常用的動(dòng)物有狗、貓、家兔和大白鼠。猴、羊、豚鼠、小鼠、雞、鳥和蛙的血壓值和急性測(cè)壓法雖有報(bào)告，但極少用于藥物對(duì)血液循環(huán)影響的常規(guī)研究。各種動(dòng)物的血壓值可參看表10-31。

表10-31　各種動(dòng)物的血壓值

　　 大白鼠血壓除對(duì)個(gè)別藥物（如毒扁豆堿)反應(yīng)異常外，對(duì)絕大多數(shù)的升壓和降壓物質(zhì)的反應(yīng)都和人或大動(dòng)物（如狗、貓)是一致的，并且反應(yīng)十分靈敏，目前它是檢定體液或組織中去甲腎上腺素等升壓物質(zhì)含量的常用動(dòng)物之一。大白鼠來源容易解決，較經(jīng)濟(jì)、用藥量少、所占工作面小。缺點(diǎn)是動(dòng)物小，操作較因難，血管較細(xì)小，易發(fā)生血液凝固，故須預(yù)先注射肝素抗凝。用狗作實(shí)驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)很多，如血壓恒定，較大白鼠、家兔等小動(dòng)物更接近人體，對(duì)藥物反應(yīng)靈敏并與人基本一致；血管和神經(jīng)較粗，管壁彈性強(qiáng)，便于手術(shù)操作和適用于分析藥物對(duì)循環(huán)系統(tǒng)的作用機(jī)制；心搏力量強(qiáng)，能描繪出完好的血壓曲線；用作藥物篩選時(shí)，可反復(fù)應(yīng)用。缺點(diǎn)是來源較困難，人體貴，不適用于需要?jiǎng)游飻?shù)量較多的實(shí)驗(yàn)。貓用于血壓試驗(yàn)時(shí)除有與狗相同的優(yōu)缺點(diǎn)外，特別值得指出的是更適用于藥物對(duì)循環(huán)系統(tǒng)作用機(jī)制的分析，因?yàn)樨埐粌H有瞬膜，便于分析藥物對(duì)交感神經(jīng)節(jié)和節(jié)后部分的影響，而且易于制備脊髓貓以排除脊髓以上的中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)血壓的影響。此外，貓?bào)w重較狗輕（實(shí)驗(yàn)可用1.8～2.5kg體重的貓)，用藥量較省。家兔來源容易，性情溫和，故亦常用血壓試驗(yàn)。但并不理想，因?yàn)榧彝脼椴菔硠?dòng)物，個(gè)體間血壓差異大，對(duì)藥物反應(yīng)不及上述各種動(dòng)物恒定和靈敏，較脆弱，尤其是長(zhǎng)毛大耳家兔易死亡，故它不適用于血壓試驗(yàn)，血管較小和心搏力量較弱，插管內(nèi)易發(fā)生血凝塊。而且約有20～30%的家兔在頸動(dòng)脈上向甲狀腺分出的一根小動(dòng)脈，碰到這一情況，宜將此分枝反線結(jié)扎剪斷，否則在其上方插入動(dòng)脈插管后，當(dāng)檢壓計(jì)加壓或開放動(dòng)脈夾時(shí)，較大量的枸櫞酸鈉可經(jīng)過此側(cè)技，造成家兔深吸氣和血壓激烈波動(dòng)，枸櫞酸鈉倒入心臟而死亡。

　　不插管（間接)測(cè)壓法：在不插管測(cè)壓法中最常用的動(dòng)物是狗、大白鼠和家兔。大白鼠不插管測(cè)壓法，常選用大白鼠尾容積測(cè)壓法、鼠尾搏動(dòng)投影響測(cè)壓法和鼠腳測(cè)壓法。狗不插管測(cè)壓法選用頸動(dòng)脈皮橋法、脛動(dòng)脈間接測(cè)壓法和股動(dòng)脈穿刺測(cè)壓法。家兔不插管測(cè)壓常選用頸動(dòng)脈皮橋測(cè)壓法和兔耳測(cè)壓法。

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