一、檢驗的一般步驟
1.資料 這里所要的是類似第七章第一節(jié)三、中所述的成組資料,不過現(xiàn)在不是兩組而是多組,如下例。
例8.1 分泌型免疫球蛋白A(SIgA)是胃腸道分泌液、淚液等外分泌液中的主要免疫球蛋白類,某院研制了“125I-SIgA放射免疫測定藥盒”,為人體SIgA的檢驗提供了一種簡便方法。為比較不同批號藥盒檢驗結(jié)果是否一致,該院曾將三批號各四個藥盒一一測定了某一標(biāo)本得結(jié)果如下,試作方差分析。
表8.1 三個批號藥盒的SIgA放射免疫測定值
批號 | SIgA含量(μg/ml), X | ∑X | n | X | ∑X2 | ∑X2-(∑X)2/n | |||
1 | 1.92 | 1.80 | 2.08 | 2.00 | 7.80 | 4 | 1.95 | 15.2528 | 0.0428 |
2 | 2.21 | 2.25 | 2.12 | 2.57 | 9.15 | 4 | 2.29 | 21.0459 | 0.1153 |
3 | 3.27 | 2.75 | 2.90 | 3.10 | 12.02 | 4 | 3.01 | 36.2754 | 0.1553 |
合計 | 28.97 | 12 | 2.414 | 72.5741 | 0.3134 |
2. 分析 從表8.1的測定結(jié)果可以看出這里有三種變異:
。1)從同一批號藥盒的四次測定結(jié)果看,不盡相同,這是組內(nèi)變異。顯然它不是由于批號不同的影響,而只是由于誤差(如批內(nèi)各藥盒的差異性和測量誤差等)造成的。
。2)從各批測定值的均數(shù)來看,是不相同的,這是組間變異,表明各批藥盒性能質(zhì)量也許對測得的結(jié)果有一定影響,也包括誤差的作用。
(3)12次測定的SIgA含量都不盡相同,有高有低,它們既可能受藥盒來自不同批號的影響,也包括組內(nèi)變異,因此稱為總變異。
那么這里各批藥盒測SIgA均值間的差別,只不過是抽樣誤差的反映呢?還是藥盒制作質(zhì)量不穩(wěn)定,批間存在顯著差別?為了得出正確的結(jié)論,可進(jìn)行方差分析。方差分析的基本甲思想是:①從總變異中分出組間變異和組內(nèi)變異,并用數(shù)量表示變異的程度;②將組間變異和組內(nèi)變異進(jìn)行比較,如兩者相差不大,說明受批號不同的影響不大;如果兩者相差較大,組間變異比組內(nèi)變異大得多,說明批號不同的影響不容忽視。下面我們根據(jù)表8.1資料來計算這三種變異。
(1)總離均差平方和:即12個觀察值各與總均數(shù)相差的平方之和,公式為
(8.1)
式中SS總即總離均差平方和,Xij表示第i組的第j個觀察值,X為全部觀察值的平均數(shù),k是組數(shù)。
本例SS總=72.5741-28.972/12=2.6357
。2)組間離均差平方和:即取各組均數(shù)代替該組各觀察值后,它們分別與總均數(shù)相差的平方之和,公式為
(8.2)
。3)組內(nèi)離均差平方和:只要加總各組本身的離均差平方和即得,公式為
(8.3)
由本例計算結(jié)果可以看出,SS組間+SS組內(nèi)=SS總,如2.3223+0.3134=2.6357。因此,算出SS總以后再計算SS組間、SS組內(nèi)兩者中之一個,其余一個便可通過減法求得。
將以上求得的幾種變異各除以自由度后得均方。自由度的計算公式分別為
總變異 N-1 (N為各組例數(shù)之和)( 8.4)
組間變異 K-1 。8.5)
組內(nèi)變異 N-K (8.6)
組間均方與組內(nèi)均方之比為F值,
F=組間均方/組內(nèi)均方 (8.7)
本例
將以上數(shù)據(jù)列入下面的方差分析表可使人一目了然。
表8.2 方差分析表
變異來源 | 離均差平方和 | 自由度 | 均 方 | F |
總 變 異 | 2.6357 | 11 | ||
組間變異 | 2.3223 | 2 | 1.1612 | 33.368 |
組內(nèi)變異 | 0.3134 | 9 | 0.0348 |
如果求得的F值小于1或略大于1,也即組間變異與組內(nèi)變異差不多,則關(guān)于不同批藥盒所致影響就不值得注意,反之,若各批均數(shù)間差別甚大,組間變異比組內(nèi)變異大得多,說明不能只把它看成為誤差的表面,很可能不同批藥盒的測定值具有差別,F(xiàn)F值遠(yuǎn)大于1,若等于或大于某α水準(zhǔn)下的臨界F值,便將拒絕檢驗假設(shè)H0而接受備擇假設(shè)H1。
本例定α=0.05,查附表8F值表,F(xiàn)0.05(2,9)=4.26。括弧內(nèi)2為求F值時分子(也即較大均方)的自由度,9為分母的自由度,今F=33.368,遠(yuǎn)大于此臨界值4.26,故P<0.05,說明不同批藥盒的影響不容忽視,各批藥盒測定的SIgA值相差顯著。
二、多個均數(shù)間的兩兩比較
經(jīng)方差分析(即F檢驗),若各組均數(shù)之間差別不顯著,則到此為止,不必作進(jìn)一步統(tǒng)計學(xué)處理了。當(dāng)F檢驗結(jié)果為相差顯著時,這只是對各組均數(shù)的整體而言,至于哪些均數(shù)間的差別顯著,哪些不顯著,還要作如下進(jìn)一步分析。
本例檢驗結(jié)果為相差顯著,這里我們先用較為簡單而實用的最小顯著差數(shù)法來比較三組中每兩組均數(shù)間的差別是否顯著,然后介紹q值法。
1.最小顯著差數(shù)法
(1)計算最小顯著性差數(shù)Dα,ν
Dα,ν=t, (8.8)
式中t,由附表3查得,查時自由度ν用方差分析表中組內(nèi)變異的自由度,本例為9;α即顯著性水準(zhǔn),常用0.05或0.01,本例查得兩個臨界t值即t0.05,9=2.262,t0.01,9=3.250。標(biāo)準(zhǔn)誤的計算公式是
(8.9)
S2組內(nèi)也即表8.2中的組內(nèi)均方(也可叫誤差均方)0.0348。nA、nB為所比較的兩組的例數(shù),本例各組例數(shù)都為4。現(xiàn)將數(shù)據(jù)代入式(8.9)、(8.8)求得
。2)用上述的最小顯著性差數(shù)與每兩組均數(shù)的相差數(shù)比,若后者大于前者(臨界值),便相差顯著,若小于前者,為相差不顯著,F(xiàn)將兩均數(shù)間的比較結(jié)果列于下表。
表8.3 均數(shù)間兩兩比較
A與B (批號) | ∣XA-XB∣ | 界值 | P值 | |
D0.05 | D0.01 | |||
1與2 | 0.34 | 0.298 | 0.429 | <0.05 |
1與3 | 1.06 | 0.298 | 0.429 | <0.01 |
2與3 | 0.72 | 0.298 | 0.429 | <0.01 |
注:表中XA-XB兩側(cè)的直杠是絕對值符號。
3.統(tǒng)計結(jié)論:各批間均在α=0.05水準(zhǔn)處相差顯著,又第3批與第1、2兩批比,P<0.01,說明各批藥盒對SIgA的檢測效果不一致,批號3遠(yuǎn)高于批號2與1。
上面介紹的多個均數(shù)間兩兩比較的方法雖較簡便,精確性有時不足,尤其當(dāng)比較的均數(shù)不是在三個而是更多,或各樣本含量不相等時應(yīng)用也較麻煩。下面介紹查臨界q值而不查t值的另一比較方法。
2.q值法
。1)將表8.1中三個均數(shù)自大至小排列得:
第3批 | 第2批 | 第1批 | |
SIgA平均值,X(μg/ml) | 3.01 | 2.29 | 1.95 |
秩次 | 1 | 2 | 3 |
樣本含量,n | 4 | 4 | 4 |
。2)用組內(nèi)均方與平均每組例數(shù)n0求出標(biāo)準(zhǔn)誤,然后與由附表9中查到的臨界q值相乘,即可列出比較表加以比較。下面是求平均例數(shù)的公式。
。╥=1,2,…,k) (8.10)
此例
本例各組樣本大小相等,均為4,本無須用上式計算,但若各組大小不等時就得用上式求平均例數(shù)。
標(biāo)準(zhǔn)誤公式為
(8.11)
此例
表8.4 均數(shù)間兩兩比較
A與B (秩次) | 組數(shù)α | ∣XA-XB∣ | Q0.05(a,ν)Sχ | ν見組內(nèi)變異一行 P值 |
3與2 | 2 | 0.34 | 0.299 | <0.05 |
3與1 | 3 | 1.06 | 0.369 | <0.05 |
2與1 | 2 | 0.72 | 0.299 | <0.05 |
現(xiàn)將上表欄目自左至右一一說明如下:
表內(nèi)左側(cè),均數(shù)大小秩次3與2比,即相鄰兩組相比,故組數(shù)a等于2。同樣,第三行的2與1比,因2與1相鄰,a也是2,3與1比則由3到1組數(shù)有3,a等于3。關(guān)于查附表9中的q值,一方面根據(jù)該表上端橫行a的數(shù)字,另方面根據(jù)表左側(cè)直行的ν,也即方差分析表中組內(nèi)(或誤差)項的自由度(本例為9)來查。表內(nèi)q值有上、下兩行數(shù),若定α為0.05,查上行,α為0.01則查下行。
就本例言,用兩種方法作均數(shù)間兩兩比較,其結(jié)論完全一致。
例8.2 下表為用動物研究白血病時測得的鼠脾DNA(脫氧核糖核酸)含量,現(xiàn)作方差分析,比較四個不同病情組的均數(shù)相差是否顯著。
表8.5 鼠脾DNA含量測定值(mg)
正常組 | 患自發(fā)性 白血病組 |
患移植白血病 | 總 計 | ||
甲組 | 乙組 | ||||
12.3 | 10.8 | 9.3 | 9.5 | ||
13.2 | 11.6 | 10.3 | 10.3 | ||
13.7 | 12.3 | 11.1 | 10.5 | ||
15.2 | 12.7 | 11.7 | 10.5 | ||
15.4 | 13.5 | 11.7 | 10.5 | ||
15.8 | 13.5 | 12.0 | 10.9 | ||
16.9 | 14.8 | 12.3 | 11.0 | ||
17.3 | 12.4 | 11.5 | |||
13.6 | |||||
∑Xijj | 119.8 | 89.2 | 104.4 | 84.7 | 398.1 |
ni | 8 | 7 | 9 | 8 | 32 |
Xi | 14.98 | 12.74 | 11.60 | 10.59 | 12.44 |
∑X2ijj | 1815.96 | 1147.32 | 1223.58 | 899.15 | 5086.01 |
SSi | 21.96 | 10.66 | 12.54 | 2.39 | 47.55 |
1.作檢驗假設(shè)H0:μ1=μ2=μ3=μ4,H1:各總體均數(shù)不都相等。α=0.01。
2.用表8.5下部數(shù)字計算離均差平方和:簡法是先求校正數(shù)C=(∑X)2/N=398.12/32,再求
SS總:5086.01-(398.1)2/32=133.40
SS組間:(119.8)2/8+(89.2)2/7+(104.4)2/9+(84.7)2/8-(398.1)2/32=85.85
SS組內(nèi):133.40-85.85=47.55
3.列出方差分析表
表8.6 方差分析表
變異來源 | 自由度 | 離均差平方和 | 均方 | F |
總 計 | 31 | 133.40 | ||
組 間 | 3 | 85.85 | 28.62 | 16.48 |
組 內(nèi) | 28 | 47.55 | 1.70 |
4.查F值表,下結(jié)論。看附表8(3),根據(jù)求F值時組間均方較大,于是用其自由度3及組內(nèi)均方的自由度28查得F0.01(3,28)=4.57,今F=16.84>F0.01(3,28)=4.57,故在α=0.01水準(zhǔn)處相差顯著,P<0.01。四組鼠脾的DNA含量不等。(注:F小于1時無須查表)。
5.為詳細(xì)分析每兩組間的相差情況,作兩兩比較如下。(因各組例數(shù)不等又組數(shù)較多,故用Q值法比較)。
(1)將四組均數(shù)按大小排列:
正常組 | 患白發(fā)性白血病組 | 患移植白血病 | ||
甲組 | 乙組 | |||
DNA平均含量(mg) | 14.98 | 12.74 | 11.60 | 10.59 |
秩次 | 1 | 2 | 3 | 4 |
樣本含量,n | 8 | 7 | 9 | 8 |
(2)求平均例數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)誤:由式(8.10)與式(8.11)計算得
。3)列表比較:
表8.7 均數(shù)間兩兩比較
A與b (秩次) | 組數(shù)a | ∣XA-XB∣ | 界 值 | P值 | |
q0.05Sχ | q0.01Sχ | ||||
4與3 | 2 | 1.01 | 1.36 | 1.86 | >0.05 |
4與2 | 3 | 2.15 | 1.65 | 2.14 | <0.01 |
4與1 | 4 | 4.39 | 1.83 | 2.32 | <0.01 |
3與2 | 2 | 1.14 | 1.36 | 1.86 | >0.05 |
3與1 | 3 | 3.38 | 1.65 | 2.14 | <0.01 |
2與1 | 2 | 2.24 | 1.36 | 1.86 | <0.01 |
注:本例組內(nèi)均方的自由度為28但q值表中左側(cè)無28,故用鄰近的較小自由度20,此外也可用內(nèi)插法求出γ為28的q值。
比較結(jié)果,除患移植性白血病甲、乙組間;甲組與自發(fā)性白血病組間(即按均數(shù)大小秩次3與4、3與2間)相差不顯著外,余均在α=0.01水準(zhǔn)處相差顯著,說明正常鼠脾DNA含量最高,患移植白血病乙組的最低。