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雞白血病的預(yù)防和控制措施
雖然雞白血病在我國雞群中將是個長期問題，但只要采取有力措施，是有可能在2~3年內(nèi)把我國蛋雞中目前很高的白血病/血管瘤死亡淘汰率從現(xiàn)有水平降低60%~70%。鑒于現(xiàn)在沒有預(yù)防ALV的疫苗，近期內(nèi)也很難研制出真正有效的疫苗，對雞白血病的預(yù)防控制需要采取綜合性的措施（圖1)。這需要在養(yǎng)雞的各個環(huán)節(jié)的不同層次采取有力措施。
政府主管部門要強化種雞群的監(jiān)控
建議農(nóng)業(yè)部畜牧司和獸醫(yī)局共同制定對各類種雞場白血病感染狀態(tài)的監(jiān)控標(biāo)準(zhǔn)，實施經(jīng)常性的監(jiān)控。并將該標(biāo)準(zhǔn)作為種雞場準(zhǔn)入市場經(jīng)營的一項必須的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)可先松后緊，逐漸向發(fā)達(dá)國家早已達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)靠近。對嚴(yán)重感染的種雞群，應(yīng)暫時取消其生產(chǎn)許可證。
對于每年從國外引進祖代雛雞的種雞場，也實施同樣的監(jiān)控。在現(xiàn)階段，對進口種雞不建議實施海關(guān)檢疫，因為這一做法不現(xiàn)實，效果也不好。但應(yīng)該要由對方提供官方的檢疫證明，并由各地獸醫(yī)主管部門對祖代雞場在飼養(yǎng)過程中作跟蹤檢疫。
對于各種雞群的監(jiān)控結(jié)果，可以用適當(dāng)?shù)男问皆谛袠I(yè)內(nèi)公布，從而能起到監(jiān)督效應(yīng)并為下游養(yǎng)雞公司選擇苗雞提供有益的參考。各下游養(yǎng)雞公司在選擇苗雞來源時，應(yīng)以苗雞的健康質(zhì)量為第一考慮因素。也就是說，要選擇多年來信譽度好的祖代或父母代種雞公司購買父母代或商品代苗雞，千萬不要拘泥于一點點價格差異。苗雞中有無外源性ALV的垂直感染或其感染的嚴(yán)重程度，對一批雞生產(chǎn)效益的負(fù)面影響帶來的經(jīng)濟損失要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于苗雞間的價格差。養(yǎng)雞行業(yè)內(nèi)應(yīng)該討論一下，種雞場是否需公布雞群對ALV感染狀態(tài)檢測結(jié)果？從而優(yōu)質(zhì)優(yōu)價！
保持種雞群對ALV的高度潔凈狀態(tài)
需要做好如下幾方面:
（1)從無外源性ALV感染的祖代雞或原種雞公司選購苗雞，這有賴于商業(yè)合同或政府主管部門提供的可靠信息。
（2)一個雞場只飼養(yǎng)同一品系和同一批（年齡)的種雞。橫向感染都是由近距離引起，同一雞場內(nèi)是無法隔離的。
（3)嚴(yán)格選用沒有外源性ALV污染的活疫苗，并定期檢測血清抗體狀態(tài)。
（4)同一孵化廳只用于同一個種雞場來源的種蛋，以預(yù)防孵化廳內(nèi)可能的早期橫向傳播。雛雞對ALV最易感，垂直感染的雛雞出殼后就可排毒。孵化廳內(nèi)雞運輸箱內(nèi)高度密集，同一箱內(nèi)有一只感染雛雞，在運輸期間可使同箱內(nèi)20%～30%的接觸雞感染。
（5)預(yù)防潛在的昆蟲傳播。
（6)建議種雞群自我檢測。當(dāng)對AB及J亞群抗體陽性率高于一定限度后自行淘汰，避免在客戶雞場出現(xiàn)問題后再發(fā)生糾紛。
強化弱毒疫苗中ALV污染的檢測和監(jiān)控
弱毒疫苗中外源性ALV污染是蛋雞、三黃雞和其它品系雞中傳播白血病的一個最可能的現(xiàn)實原因之一。對商品代雞群來說，特別要注意一周齡內(nèi)使用的活疫苗，如對馬立克氏病和禽痘的活疫苗。但是在種雞群，各種活疫苗都要檢測，特別是非口服疫苗。前幾年美國市場上供應(yīng)的馬立克氏病疫苗中還發(fā)現(xiàn)有ALV-A污染，我國生產(chǎn)的疫苗可能會問題更多。
問題是如何檢測？要檢測疫苗中的ALV污染，一定要區(qū)別內(nèi)源性和外源性ALV，否則會帶來很大的混亂，即報告很多的假陽性�？梢愿鶕�(jù)情況依次從如下幾種方法中做一選擇：
（1)經(jīng)典方法（金標(biāo)準(zhǔn))。將一定劑量（相當(dāng)于雛雞用量的3～5倍)活疫苗接種8～10只3～4周齡SPF雞，在隔離罩中飼養(yǎng)4～6周后采血清，隔2周后用商品化的抗體檢測試劑合檢測ALV-AB和ALV-J特異性抗體。同時在另一隔離罩中飼養(yǎng)同批SPF雞做對照。隔2周后重復(fù)一次。接種疫苗組中只要有2只或以上表現(xiàn)對ALV-AB和ALV-J特異性抗體陽性而對照組全陰性，即可判定疫苗有ALV-AB或ALV-J污染。如為陰性，可隔2周后重復(fù)一次。這一方法成功率高，結(jié)果比較可靠，但周期長，成本高，需要一定飼養(yǎng)條件醫(yī)學(xué)全在線搜集整,理zxtf.net.cn。
（2)在DF1細(xì)胞（對E亞群ALV有抵抗力)上分離病毒，再用ALVp27試劑合檢測。這一方法適用于在該細(xì)胞上不產(chǎn)生細(xì)胞病變的疫苗病毒。對但有些疫苗病毒感染后細(xì)胞死亡，無法進行。對細(xì)胞結(jié)合性馬立克氏病疫苗，可先將疫苗細(xì)胞在超聲波處理下裂解或用無菌蒸餾水稀釋裂解后接種DF1細(xì)胞，以此最大限度去處MDV疫苗病毒復(fù)制。對于禽痘疫苗病毒，可先接種1周齡SPF雞，再在7～10天后采血漿接種DF1 細(xì)胞。
（3)PCR擴增囊膜蛋白全基因及其相連的3’-末端序列，測序比較和鑒定亞群。鑒于有些細(xì)胞基因組中可帶有ALV-AB、J的Env基因，單獨擴增出Env基因還不能作為依據(jù)，一定要擴增到Env基因的及其相連的3’-末端序列，并證明其3’-末端序列中的LTR也是外源性ALV特異性的，才有較大把握作出判斷。但要下最終結(jié)論，最好還要靠分離到病毒。
由于ALV的橫向傳播能力很弱，除非有嚴(yán)重的垂直感染，一般雞群對外源型ALV抗體的陽性率是很少會高于30%的。因此，如果雞群對ALV-AB 或ALV-J的抗體陽性率高于30%時，就要懷疑在過去用過的弱毒活疫苗中是否有哪種疫苗有ALV污染。這對種雞場尤為重要，雖然在使用被ALV-AB 或ALV-J污染的疫苗后的雞群不一定就會發(fā)生腫瘤（一般不會，因為雞對ALV的抵抗力有很明顯的年齡依賴性)，但有可能是給下一代造成垂直感染的來源。因此，有必要對種雞群作定期的血清學(xué)檢測。
原種雞群的凈化
對我國自行育種并已形成相應(yīng)品系的自繁自養(yǎng)種雞群，應(yīng)該對外源性白血病感染實施定期檢測和嚴(yán)格的凈化措施。這項工作在技術(shù)操作上涉及到育種選種和長期病毒感染檢測的諸多方面措施，需要較大的資金投入。作為一個大國，必須要有自己自繁自養(yǎng)種雞群，但也必須實現(xiàn)對白血病的凈化。這需要從國家層次，由政府立項資助幾個不同類型種雞的龍頭企業(yè)完成凈化并保持凈化狀態(tài)。這一方面是企業(yè)行為，但也要政府在技術(shù)和資金方面資助，并實施監(jiān)控。
凈化的基本原則：（1)小群孵化小群飼養(yǎng)（20～50只/群)；（2)每只采樣分離病毒或檢測p27，淘汰所有陽性雞及所有同群雞；（3)嚴(yán)格選用弱毒活疫苗；（4)嚴(yán)禁不同種群雞共用孵化廳。
在我國現(xiàn)有條件下原種雞群凈化方案列舉如下（僅供參考)：
方案A （國際金標(biāo)準(zhǔn))完全按美國喬治亞大學(xué)禽病診斷和研究中心現(xiàn)在正在使用的方法。 對核心群雞全部采血漿接種DF-1細(xì)胞，9天后檢測p27抗原，凡陽性者全部淘汰。分別在68日齡和168日齡至少做二次采血分離病毒。對保留的核心群種雞的下一代所有剛出殼雞，檢測胎糞中的p27，淘汰所有陽性雞。如此反復(fù)。
這一方案的優(yōu)點是，檢測特異性和檢出率均很高，如嚴(yán)格實施4～5年，就有可能實現(xiàn)基本凈化，此后只需抽樣監(jiān)控，不再全面檢測。缺點是，現(xiàn)在就需要投入的資金、設(shè)備和人力較大，而且還沒有足夠數(shù)量的訓(xùn)練有素的有經(jīng)驗的技術(shù)隊伍。方案B 基本原則：根據(jù)泄殖腔棉拭子及蛋清中g(shù)sP27抗原檢測，陽性者都全部淘汰。
優(yōu)點：方法簡單，成本相對較低，每次可檢測所有個體樣品。
方案B 基本原則：根據(jù)泄殖腔棉拭子及蛋清中g(shù)sP27抗原檢測，陽性者都全部淘汰。
優(yōu)點：方法簡單，成本相對較低，每次可檢測所有個體樣品。
缺點：不能區(qū)別內(nèi)源性E亞群ALV將會把感染了內(nèi)源性E群但外源性ALV陰性雞也淘了。但是當(dāng)陽性率高時，對選種不利，很難被育種專家接受。另一方面，單靠泄殖腔棉拭子及蛋清中g(shù)sP27抗原檢測，其靈敏度尚不足以檢測出所有感染雞。因此，只能保持雞群相對較高的潔凈度，但不能完全凈化。因而，檢測和凈化過程需不斷進行醫(yī)學(xué)全在線搜集整,理zxtf.net.cn。
適應(yīng)情況：當(dāng)整個后備雞群p27陽性率在20%以下或在育種專家可接受全部淘汰的范圍內(nèi)時，可采取這一方法。具體程序：母雞和公雞：（1)18～20W 棉拭子檢測p27；（2)21～22W 棉拭子檢測p27，如人工授精，最初次2要同時檢測公母雞；（3)23～25W （開產(chǎn)初期)棉拭子檢測最初第1～3個，蛋的蛋清中p27；（4)~40W（準(zhǔn)備孵化留種時)，公母雞棉拭子檢測p27，母雞 2個蛋的蛋清檢測p27；（5)．~43W 孵出小雞，對每只后備母雞最初孵出的二只小雞，胎糞棉拭子檢測p27。
方案C 這是將前二個方案結(jié)合起來�；驹瓌t：將對棉拭子p27陽性和陰性雞分開飼養(yǎng)，p27陽性雞分別取血清或蛋清在DF1細(xì)胞上分離外源性ALV，僅淘汰外源性ALV陽性雞
優(yōu)點：能區(qū)別內(nèi)外源ALV，將僅僅淘汰外源性ALV陽性雞，仍保留內(nèi)源性病毒陽性雞。
缺點：增加了一道鑒別性細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)性要求高，人力成本、試劑成本及實驗室裝備較方案B明顯提高，但顯著低于方案A。
適應(yīng)情況：當(dāng)整個雞群棉拭子或蛋清中p27陽性率超過20%，非外源性ALV淘汰率過高影響育種而不能為育種專家接受時。或者說，在我國現(xiàn)在的條件下，但各相關(guān)的原種雞群還沒有條件按方案A實施凈化時，這一替代方案是最適合的過度階段。先投入有限的資金和人力，采用這一方案 開始做起來，待有足夠力量時再采用反案A。
具體程序：基本同方案A，但要把p27陽性和陰性雞群分隔飼養(yǎng)，分別定為陰性和陽性群。僅對陽性雞群中的每只雞按方案A采血分離病毒。這樣，可暫時把病毒分離的工作量減少80%。
