獲得具有正確鍵合的胱氨酸鍵的胰島素或胰島素衍生物的方法
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公開(公告)號
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CN1483831A
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公開(公告)日
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2004.03.24
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申請(專利)號
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CN03152330.7
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申請日期
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1998.08.17
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專利名稱
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獲得具有正確鍵合的胱氨酸鍵的胰島素或胰島素衍生物的方法
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主分類號
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C12P21/02
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分類號
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C12P21/02
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分案原申請?zhí)? |
98117909.6
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優(yōu)先權
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1997.8.18 DE 19735711.3
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申請(專利權)人
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阿文蒂斯藥物德國有限公司
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發(fā)明(設計)人
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F·J·魯伯洛德;R·凱勒
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地址
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聯邦德國法蘭克福
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
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代理人
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郭建新
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國省代碼
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德國;DE
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主權項
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一種從胰島素或胰島素衍生物的前體獲得具有正確鍵合的胱氨酸鍵的胰島素或胰島素衍生物的方法，所述前體在半胱氨酸或鹽酸半胱氨酸和離液助劑的存在下經歷一個折疊過程，在該折疊過程之后，通過如下方式從所述前體獲得胰島素或胰島素衍生物：采用胰蛋白酶或類胰蛋白酶并且任選另外采用羧肽酶B進行酶裂解，接著在吸附樹脂上進行純化；該方法包括依次實施以下步驟以完成所述折疊過程：(a)將胰島素或胰島素衍生物的前體的水懸浮液與一定量的半胱氨酸或鹽酸半胱氨酸混合，該量導致1～15個半胱氨酸或鹽酸半胱氨酸的SH殘基/前體的半胱氨酸殘基；(b)在pH值約8～約15、溫度約15～約55℃下，將含半胱氨酸或鹽酸半胱氨酸的前體懸浮液加入到濃度為4～9M的離液助劑溶液中，使所得混合物在所述溫度下保持約10～60分鐘；和(c)在pH值約8～約15、溫度約5～約30℃下，將混合物加入到一定量的水中，使得混合物中半胱氨酸或鹽酸半胱氨酸的濃度稀釋到大約1～5mM，離液助劑的濃度稀釋到0.2～0M。
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摘要
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一種從胰島素或胰島素衍生物的前體獲得具有正確鍵合的胱氨酸鍵的胰島素或胰島素衍生物的方法，所述前體在半胱氨酸或鹽酸半胱氨酸和離液助劑的存在下經歷一個折疊過程，在該折疊過程之后，通過如下方式從所述前體獲得胰島素或胰島素衍生物：采用胰蛋白酶或類胰蛋白酶并且任選另外采用羧肽酶B進行酶裂解，接著在吸附樹脂上進行純化。
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國際公布
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