一種從谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶發(fā)酵液中提取谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶的方法
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公開(公告)號
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CN1160455C
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公開(公告)日
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2004.08.04
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申請(專利)號
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CN02148526.7
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申請日期
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2002.12.10
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專利名稱
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一種從谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶發(fā)酵液中提取谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶的方法
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主分類號
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C12N9/10
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分類號
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C12N9/10;C07K1/36
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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江南大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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陳堅(jiān);堵國成;燕國梁;倫世儀
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地址
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214036 江蘇省無錫市惠河路170號
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頒證日
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2004.08.04
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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無錫市大為專利事務(wù)所
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代理人
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時旭丹
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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一種從谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶發(fā)酵液中提取谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶的方法，其特征是發(fā)酵液經(jīng)壓濾、超濾濃縮、溶劑沉析、離心分離、真空干燥、成品包裝而制得成品谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶，在溶劑沉析、真空干燥、成品包裝前加入大豆蛋白或酪蛋白和復(fù)合磷酸鹽輔料參與工藝進(jìn)行；壓濾：將谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶發(fā)酵液進(jìn)行板框壓濾；超濾濃縮：將壓濾得到的濾液通過超濾膜進(jìn)行超濾濃縮，膜截留分子量為10,000，控制酶液溫度不超過10℃；溶劑沉析：將得到的超濾濃縮液加1％(w/w)輔料，充分?jǐn)嚢�，緩慢加�?.5～2倍(v/v)于濃縮液體積的溶劑進(jìn)行沉析，溫度不超過10℃；離心分離：對上清液回收再利用有機(jī)溶劑，沉淀物即為酶泥；真空干燥：按酶泥的1％(w/w)加入輔料，然后進(jìn)行真空干燥；成品包裝：將粗酶粉碎，按需要添加輔料至成品酶制劑活力為50～100u/g，抽真空包裝得到成品，不超過10℃保存。
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摘要
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一種從谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶發(fā)酵液中提取谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶的方法，特別是用有機(jī)溶劑沉析的方法，屬于微生物發(fā)酵法制備谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明解決了發(fā)酵液不需經(jīng)過離子交換處理，易于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)問題。本發(fā)明中，發(fā)酵液經(jīng)壓濾、超濾濃縮、溶劑沉析、離心分離、真空干燥、成品包裝而制得成品谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶，在溶劑沉析、真空干燥、成品包裝前加入輔料參與工藝進(jìn)行。添加輔料對于提高酶活收率有顯著效果。壓濾后收集濾渣菌體，機(jī)械破碎，加適量清水配成酶液后，以相同的方法單獨(dú)重復(fù)進(jìn)行提取，以提高酶的提取率。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是工藝合理、設(shè)備簡單、操作方便、成本低廉，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
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國際公布
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