方法名稱： |
白芍提取物--白芍總苷含量測(cè)定--HPLC法 |
應(yīng)用范圍： |
測(cè)定白芍提取物中白芍總苷的含量 |
方法原理： |
白芍藥材水提取得白芍總苷，白芍總苷經(jīng)5%NaOH經(jīng)超聲處理，沸水浴水解，經(jīng)液相色譜儀分離，在230nm處測(cè)定峰面積，以苯甲酸為對(duì)照品，計(jì)算其中白芍總苷的含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 Waters 1525泵，2487雙通道紫外檢測(cè)器，Waters柱溫箱，Breeze 液相色譜工作站(美國(guó)Water 公司)； 色譜條件 Supelco Discovery C18色譜柱(4.mm×150.mm,5μm)；流動(dòng)相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀-異丙醇-冰醋酸(67∶173∶4∶4)；檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm；流速：1mL/min；柱溫：35℃。 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 精稱5.2mg苯甲酸對(duì)照品，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密吸取該溶液1mL，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制得濃度為8.32μg·mL- 1的苯甲酸對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 稱取市售白芍飲片1.0kg，加水10倍，煎煮2.0h，第2次加水8倍，煎煮1.5h，合并煎液，濾過(guò)，濾液過(guò)已處理好的大孔吸附樹脂，先用水洗滌，再用70%乙醇洗脫，回收乙醇，干燥，得紫棕色粉末，即為白芍總苷。精密稱取白芍總苷粗品約30mg至25mL量瓶，加5%NaOH溶液至刻度，超聲，溶解，搖勻。精密吸取該溶液0.5mL，置5mL具塞試管中，沸水浴水解2h后，冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至10mL量瓶，用流動(dòng)相與甲醇反復(fù)蕩洗試管壁，定容至刻度，搖勻，即得。 |
操作步驟： |
精密吸取該溶液5μL，注入色譜儀，由峰面積計(jì)算出苯甲酸的含量，再由公式：白芍總苷含量% = 苯甲酸含量%×480.27 122.12，計(jì)算白芍總苷的含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
劉玉紅,陳燕,易進(jìn)海.HPLC測(cè)定白芍總苷的含量.華西藥學(xué)雜志.2002,17(4):295～296 |
