方法名稱： |
苦丁茶老葉—槲皮素和山柰素的含量測定—HPLC |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于苦丁茶老葉中槲皮素和山柰素含量的測定 |
方法原理： |
本品剪碎加70 %乙醇回流提取，經(jīng)液相色譜分離，在360 nm處測定峰面積，外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器 Waters液相色譜儀（美國Waters公司) 色譜條件 色譜柱：Waters公司N0va—PakC18柱（3.9 mm×300 mm，4 μm)；流動相：甲醇—0.4 %磷酸溶液（50∶50) ；流速：0.7 mL/min；檢測波長：360 nm；柱溫：40 ℃ |
試樣制備： |
對照品溶液制備 精密稱取槲皮素對照品8.12 mg，山柰素對照品8.34 mg，分別置50 mL量瓶中，用甲醇溶解，并稀釋至刻度再稀釋2.5倍即得對照品溶液。 供試品溶液制備 稱取苦丁茶老葉20 g，剪碎，加70 %乙醇200 mL，水浴回流1.5 h，過濾，殘渣再加70 %乙醇100 mL，回流1 h；合并濾液，用70 %乙醇定容至250 mL量瓶中。取20 mL提取液置水浴上揮干，再用20 mL甲醇溶解殘渣并轉(zhuǎn)移到100 mL錐形瓶中，加入25 %鹽酸溶液5 mL，置水浴上回流水解0.5 h后，取出，迅速冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取槲皮素和山柰素對照液以及苦丁茶供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算槲皮素和山柰素含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
蒙大平，黃雪梅，鄧玉莊. 苦丁茶老葉中槲皮素和山柰素的含量測定. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志. 2006，26（2)：135～137 |
