方法名稱: |
卷柏—腺苷—RP-HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于卷柏中腺苷含量的測定 |
方法原理: |
本品加50 %乙醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在260 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器 島津LC-5A高效液相色譜儀,Waters 486型紫外檢測器,N2000型色譜工作站 色譜條件 色譜柱:SHIM-PACK CLC-ODS(6 mm×150 mm)柱;流動相:水-甲醇(100∶2);流速:0.6 mL/min;檢測波長:260 nm;柱溫:室溫 |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精密稱定腺苷10 mg置于10 mL容量瓶中,加50 %乙醇溶解,并定容至刻度,作為對照品溶液備用,用時適當(dāng)稀釋。 供試品溶液制備 精密稱定樣品干燥粉末(60 ℃干燥粉碎,過40目篩)各1 g,分別置于4個50 mL小三角瓶中,用乙醚(30 mL,30 min/次,兩次)浸泡脫脂脫色后,濾去乙醚。揮干殘余物中的乙醚,加入30 mL 50 %乙醇超聲提取(30 min/次,兩次),合并濾液,水浴蒸干,殘渣用50 %乙醇溶解轉(zhuǎn)移并定容于10 mL的容量瓶中;再精密各取1 mL置5 mL容量瓶中,50 %乙醇稀釋至刻度,搖勻,即為樣試品溶液,用時經(jīng)0.45 μm濾膜過濾。 |
操作步驟: |
分別精密吸取腺苷對照液以及卷柏供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算腺苷含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
鄭曉珂,馮衛(wèi)生,畢躍峰等.RP-HPLC法測定卷柏中腺苷的含量.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2003. 17(2): 42~44 |