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您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 >> 藥學(xué)理論 >> 中藥及天然藥物質(zhì)量控制研究方法 >> 正文:羅漢果—羅漢果苷ⅡE、苷Ⅲ的測(cè)定方法—HPLC中藥質(zhì)量控制方法/操作步驟
    

羅漢果—羅漢果苷ⅡE、苷Ⅲ的測(cè)定方法—HPLC

  
方法名稱(chēng):
  羅漢果 —羅漢果苷ⅡE、苷Ⅲ的測(cè)定 — HPLC
應(yīng)用范圍:
  本方法適用于羅漢果中羅漢果苷ⅡE、苷Ⅲ含量的測(cè)定
方法原理:
 本品加甲醇回流提取,經(jīng)液相色譜分離,在203 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器    Agilent-1100分析型高效液相色譜儀,包括二極管陣列多波長(zhǎng)檢測(cè)器DAD、四元梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、7725i動(dòng)進(jìn)樣器、HP化學(xué)工作站(美國(guó)Agilent公司)

試劑    羅漢果甙ⅡE、Ⅲ對(duì)照品(本實(shí)驗(yàn)室自制,TLCRf值、IR、NMR值均與文獻(xiàn)報(bào)道一致,液相色譜峰為單峰,純度分別達(dá)到98.1 %、98.5 %)

    色譜條件    色譜柱:ZORBAX SB-C18柱(4. 6 mm ×150 mm,5 μm);流動(dòng)相:乙腈-水(體積比25:75);流速:1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):203 nm;柱溫:25 ℃;進(jìn)樣量:10 μL
試樣制備:
 

對(duì)照品溶液制備    精密稱(chēng)取羅漢果苷ⅡE對(duì)照品9. 67 mg10. 35 mg,置于10 mL容量瓶中,用流動(dòng)相乙腈-水(體積比2575)溶液,超聲溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為對(duì)照品溶液備用。

    供試品溶液制備    精密稱(chēng)取樣品1. 0000 g于100 mL錐形瓶,加入甲醇20 mL回流提取3次(2 h ×1 h ×1 h),過(guò)濾,濾液減壓回收甲醇至干,干狀物加入蒸餾水適量,超聲溶解,上HPD-200大孔樹(shù)脂柱,先水洗80 mL,再用85 ℃乙醇100 mL洗脫,乙醇洗脫液直接通過(guò)330、732陰陽(yáng)離子交換柱,收集流出液,柱再用約100 mL 85 ℃乙醇洗脫,合并洗脫液減壓回收至干,用乙腈-水(體積比25:75)溶液定容至5 mL容量瓶,用微孔濾膜(0. 45 μm)過(guò)濾,濾液作為供試品溶液備用。
操作步驟:
  分別精密吸取羅漢果苷ⅡE、苷Ⅲ對(duì)照液以及羅漢果供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算羅漢果苷ⅡE、苷Ⅲ含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:zxtf.net.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  李典鵬等. HPLC 法測(cè)定羅漢果中羅漢果苷ⅡE、苷Ⅲ的含量. 天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā) .2006,18:850~853
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