含狗脊制劑—狗脊補(bǔ)腎片-原兒茶酸和原兒茶醛的含量測(cè)定方法—HPLC-DA

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方法名稱：

含狗脊制劑—狗脊補(bǔ)腎片-原兒茶酸和原兒茶醛的含量測(cè)定—HPLC-DAD

應(yīng)用范圍：

用于狗脊補(bǔ)腎片中原兒茶酸和原兒茶醛的含量測(cè)定

方法原理：

本品研細(xì)后，先用0.1mol·L^-1鹽酸酸化，再用醋酸乙酯超聲提取，提取液蒸干，用甲醇溶解，經(jīng)液相色譜儀分離，在280nm出測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算含量。

儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：

儀器設(shè)備 LC-2010AHT高效液相色譜儀；DAD檢測(cè)器(日本島津制作所)

色譜條件　色譜柱: ZORBAX SB-C18 ( 250mm×4.6mm，5μm)分析柱；流動(dòng)相:甲醇-0.1%磷酸溶液(15∶85)；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；柱溫:40℃；流速：1.0ml/min。

試樣制備：

對(duì)照品溶液的制備取分別減壓干燥至恒重的原兒茶酸和原兒茶醛對(duì)照品適量，精密稱定，分別加甲醇制成每1ml含原兒茶酸50μg、原兒茶醛6μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備取本品20片，研細(xì)，混勻，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入0.1mol·L^-1 鹽酸3ml，將粉末完全潤(rùn)濕10min后，加醋酸乙酯20ml，超聲處理15min，濾過(guò)，殘?jiān)偌哟姿嵋阴?0ml，重復(fù)處理一次，殘?jiān)?ml醋酸乙酯洗滌，合并濾液和洗液，減壓回收醋酸乙酯至干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜( 0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液液各10μl，注入液相色譜儀，依上述色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

附件：

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備注：

參考文獻(xiàn)：

賈恒明，劉敏，張良等. HPLC法測(cè)定狗脊補(bǔ)腎片中原兒茶酸和原兒茶醛的含量. 　解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào).2006.22（6)：448～450

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