紅豆杉幼苗—紫杉醇的含量測定方法—HPLC-DAD

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方法名稱：

紅豆杉幼苗—紫杉醇的含量測定—HPLC-DAD

應(yīng)用范圍：

用于人工栽培南方紅豆杉幼苗中紫杉醇的含量測定

方法原理：

本品粉末用超聲提取、離心、過柱等一系列處理后，經(jīng)液相色譜儀分離，在230nm處測定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：

儀器設(shè)備美國Waters Allaince 2695型高效液相色譜儀；Waters 2996型二極管陣列檢測器。

色譜條件色譜柱：Waters Symmetry C18 ( 150mm×3.90mm)；C18小柱；流動相：甲醇-乙腈-水 (22：36∶42) ；流量：1.0ml/min；檢測波長：230nm；進(jìn)樣量：10μL。

試樣制備：

對照品溶液的制備　精密稱取紫杉醇對照品適量，以乙腈溶解并稀釋成10.2mg/ml的溶液備用。

供試品溶液的制備　精密稱取本品粉末3g于100ml錐形瓶中，加95%乙醇25ml浸泡24h，超聲處理2h，離心（3000rad/s，3min)過濾，殘?jiān)m(xù)以95%乙醇15ml浸泡超聲2次，每次30min，離心，取上清液，合并濾液于100ml燒杯之哦那個(gè)30℃以下風(fēng)干，殘?jiān)?0%甲醇5ml溶解，離心，取上清液過0.45μm濾膜，濾液過C18小柱，用10ml水洗脫，棄去洗脫液，再用6ml50%甲醇溶液洗脫，棄去洗脫液，最后用2ml80%甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，為備用液。

操作步驟：

精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，依上述色譜條件測定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

附件：

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備注：

參考文獻(xiàn)：

鄭廣樂，葛彬彬，黃天偉等.HPLC法分析紅豆杉中紫杉醇的含量.福建分析測試.2004，13（3-4)：2011～2013

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