腦得生片－人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的測(cè)定－高效液相色譜法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫(kù)中心藥學(xué)論壇腦得生片－人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的測(cè)定－高效液相色譜法

方法名稱(chēng)：

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定腦得生片中人參皂苷Rg₁、人參皂苷Rb₁、三七皂苷R₁的含量。

本方法適用于中成藥腦得生片。

方法原理：

本品經(jīng)超聲處理，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)203nm處檢測(cè)人參皂苷Rg₁、人參皂苷Rb₁、三七皂苷R₁的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑：

1.乙腈

2.正丁醇

3..氨試液

4 ,甲醇

儀器設(shè)備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按人參皂苷Rg₁計(jì)算應(yīng)不低于8000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B

時(shí)間（分鐘)	流動(dòng)相A（%)	流動(dòng)相B（%)
0~20	20→40	80→60
20~26	20	80

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱(chēng)取供試品

取本品20片，除去糖衣，精密稱(chēng)定，研細(xì)，取約1g，精密稱(chēng)定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取人參皂苷Rb₁對(duì)照品、人參皂苷Rg₁對(duì)照品、三七皂苷R₁對(duì)照品適量，分別加甲醇制成每1mL含人參皂苷Rb₁0.75mg、人參皂苷Rg₁0.75mg、三七皂苷R₁0.15mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品，置具塞錐形瓶中，精密加入水飽和的正丁醇50mL，密塞，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)20分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用水飽和的正丁醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25 mL，置分液漏斗中，加氨試液洗滌2次（15 mL，10 mL)，取正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓D(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)203nm處測(cè)定人參皂苷R_g1（C₄₂H₇₂O₁₄)、人參皂苷Rb₁（C₅₄H₉₂O₂₃)、三七皂苷R₁（C₄₇H₈₀O₁₈)的峰面積，計(jì)算出其含量。