細(xì)胞色素C溶液—細(xì)胞色素C的測(cè)定—分光光度法

本方法采用分光光度法測(cè)定細(xì)胞色素C溶液中細(xì)胞色素C的含量。

本方法適用于細(xì)胞色素C溶液。

取本品適量，加磷酸鹽緩沖液溶解并定容，再加連二亞硫酸鈉，照紫外-可見分光光度法，在550nm波長(zhǎng)處，以間隔0.5nm找出最大吸收波長(zhǎng)，測(cè)定吸光度，按細(xì)胞色素C的吸收系數(shù)（E1m)為23.0計(jì)算，即得。

1. 連二亞硫酸鈉

2. 磷酸鹽緩沖液

1. 磷酸鹽緩沖液

取磷酸二氫鈉1.38g與磷酸氫二鈉31.2g，加水適量使溶解成1000mL，調(diào)節(jié)pH值至7.3。

2.供試品溶液的制備

精密量取本品適量（相當(dāng)于細(xì)胞色素C100mg)，置10mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

供試品的測(cè)定

精密量取上述供試品溶液1mL置50mL的量瓶中，加磷酸鹽緩沖液溶解并定容，再加連二亞硫酸鈉15mg，照紫外-可見分光光度法，在550nm波長(zhǎng)處，以間隔0.5nm找出最大吸收波長(zhǎng)，依法測(cè)定吸光度，按細(xì)胞色素C的吸收系數(shù)（E1m)為23.0計(jì)算，即得。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.370。