亞葉酸鈣膠囊－亞葉酸鈣－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定亞葉酸鈣膠囊中亞葉酸鈣的含量。

本方法適用于亞葉酸鈣膠囊。

供試品加水溶解并定量稀釋?zhuān)�進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)280nm處檢測(cè)亞葉酸鈣的峰面積，計(jì)算出其含量。

1.甲醇

2. 含0.1%四丁基氫氧化銨的磷酸氫二鈉緩沖液

取10%四丁基氫氧化銨水溶液8.0mL和磷酸氫二鈉2.2g加水溶解使成780mL，并用磷酸調(diào)節(jié)pH值至7.8。

1.儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按亞葉酸鈣峰計(jì)算應(yīng)不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2.色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 含0.1%四丁基氫氧化銨的磷酸氫二鈉緩沖液=22 78

2.3 柱溫：40℃

1. 含0.1%四丁基氫氧化銨的磷酸氫二鈉緩沖液

取10%四丁基氫氧化銨水溶液8.0mL和磷酸氫二鈉2.2g加水溶解使成780mL，并用磷酸調(diào)節(jié)pH值至7.8。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取亞葉酸鈣對(duì)照品適量，加水溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.1mg的溶液，即為對(duì)照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于亞葉酸20mg)，置200mL量瓶中，加水適量，振搖，使亞葉酸鈣溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)280nm處測(cè)定亞葉酸鈣（C₂₀H₂₁CaN₇O₇·5H₂O)的峰面積，計(jì)算出其含量，并將結(jié)果乘以0.9256。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.187。