葉酸片－葉酸－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定葉酸片中葉酸的含量。

本方法適用于葉酸片。

1 .甲醇

2. 磷酸二氫鉀

3. 0.1mol/L氫氧化鉀溶液

4. 0.5%氨溶液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：以磷酸二氫鉀6.8g與0.1mol/L氫氧化鉀溶液70mL，加水稀釋至850mL，并調(diào)節(jié)pH值至6.3±0.1，加甲醇80mL，用水稀釋成1000mL的溶液

2.2 檢測波長：254nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

精密稱取葉酸對照品約5mg，置25mL量瓶中，加0.5%氨溶液約15mL溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取本品50片（0.4mg規(guī)格)或20片（5mg規(guī)格)，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于葉酸5mg)，置25mL量瓶中，加0.5%氨溶液約15mL，置熱水浴中加熱20分鐘，時時振搖使葉酸溶解，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，續(xù)濾液即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p.109。