尼爾雌醇原料藥－尼爾雌醇－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定尼爾雌醇原料藥中尼爾雌醇的含量。

本方法適用于尼爾雌醇原料藥。

供試品經(jīng)甲醇溶解并稀釋，再取適量加流動相稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長221nm處檢測尼爾雌醇的峰面積，計算出其含量。

甲醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按尼爾雌醇峰計算應不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水=80 20

2.2 檢測波長：221nm

2.3 柱溫：室溫

1.對照品溶液的制備

精密稱取尼爾雌醇對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.1mg溶液，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.1mg溶液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長221nm處測定尼爾雌醇（C₂₅H₃₂O₃)的峰面積，計算出其含量。