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2.3 地塞米松對(duì)腭胚突間充質(zhì)細(xì)胞的抑制率圖像結(jié)果表明 Dex 濃度為1×10－6mol/l 組抑制率明顯較其他組高。各組在第3 天時(shí)抑制率分別達(dá)到一個(gè)峰值，過(guò)后隨著時(shí)間延長(zhǎng)，抑制率逐漸降低。
2.4 不同濃度地塞米松對(duì)腭胚突間充質(zhì)細(xì)胞凋亡影響的PI 染色Dex 濃度為1×10－6mol/l 組通過(guò)PI 染色后，熒光顯示，整個(gè)視野幾乎50%以上的均為凋亡細(xì)胞和死細(xì)胞，這些細(xì)胞整個(gè)收縮為圓形，發(fā)紅發(fā)亮，其余細(xì)胞亮度低，形態(tài)較為正常，胞內(nèi)核有輕微著紅色（圖4)。濃度為1×10－7mol/l，1×10－8mol/l 組視野中凋亡細(xì)胞和死細(xì)胞約占總數(shù)的40%左右（圖5，6)。濃度為1×10－9mol/l 組約有20%～30%的為凋亡細(xì)胞和死細(xì)胞，其余絕大多數(shù)的細(xì)胞著色淺（圖7)。未加藥對(duì)照組該類細(xì)胞約占總數(shù)的10%左右，并且總體上對(duì)照組的著色都比加藥組要淺，亮度也較低，大多數(shù)細(xì)胞都只有核輕微著色，胞內(nèi)核數(shù)目清晰可見(jiàn)。
3 討論
有研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠腭突發(fā)育過(guò)程中給予大劑量的地塞米松，可抑制腭胚突生長(zhǎng)并導(dǎo)致腭裂，這可能是因?yàn)橛绊懥思?xì)胞的正常代謝[4-5]。但地塞米松作用的作用規(guī)律尚不明了。本研究觀察了不同濃度地塞米松對(duì)離體腭胚突間充質(zhì)細(xì)胞的量-效關(guān)系及時(shí)效關(guān)系，發(fā)現(xiàn)：
第1、2 天，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組EPM 細(xì)胞OD 值增高，與對(duì)照組有差異（ P<0.05)，說(shuō)明Dex 已經(jīng)發(fā)生藥效。但各相鄰濃度組OD 值組間差值很小，各組變化趨勢(shì)尚不明顯，曲線較平緩，各濃度梯度間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05)。此時(shí)不同濃度藥物的作用差異還沒(méi)有顯現(xiàn)出來(lái)。
但第3 天各濃度組間差距開(kāi)始顯現(xiàn)。差值最小0.008，最大為0.032，與對(duì)照組相比差值更為顯著。第4、5 天曲線又趨于平緩，各組OD 值增加緩慢。這些現(xiàn)象說(shuō)明，第3 天達(dá)到了Dex藥物作用的最高峰，第4、5 天隨著藥物的代謝，其對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用逐漸減小。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，各濃度組生長(zhǎng)曲線與對(duì)照組相似，但增殖活躍度明顯較對(duì)照組差。這說(shuō)明選擇的這四個(gè)Dex 濃度對(duì)于EPM 細(xì)胞的正常生長(zhǎng)產(chǎn)生了影響，阻礙其正常增殖，達(dá)到了預(yù)期的地塞米松的藥理作用，是符合實(shí)驗(yàn)要求的有效濃度。說(shuō)明第3 天既是EPM 細(xì)胞增殖最活躍的時(shí)間，也是Dex 藥效最大的時(shí)間。醫(yī).學(xué).全.在.線zxtf.net.cn
地塞米松的量-效關(guān)系及時(shí)-效關(guān)系還表現(xiàn)為，第1 天各濃度梯度組與對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；第2、3、4 天前三個(gè)濃度組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；第5 天只有前兩組與對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而所有5 天中Dex 濃度為1×10－6mol/l 組與對(duì)照組均有差別（P<0.01)，這說(shuō)明這個(gè)濃度對(duì)于EPM 細(xì)胞增殖的藥理作用最為持久、有效。通過(guò)對(duì)腭胚突間充質(zhì)細(xì)胞凋亡的PI熒光染色發(fā)現(xiàn)，濃度為1×10－9mol/l 組僅有20%～30%的為凋亡細(xì)胞和死細(xì)胞，濃度為1×10－6mol/l 組通則有50%的細(xì)胞凋亡，地塞米松對(duì)腭胚突間充質(zhì)細(xì)胞作用的有效性更加明顯，而該濃度作用下的存活的腭胚突間充質(zhì)細(xì)胞又能在第4、5 天后快速增殖并接近其他組細(xì)胞的增殖水平。本實(shí)驗(yàn)顯示：地塞米松濃度為1×10－6mol/l 時(shí)，既能在一定程度上抑制EPM 細(xì)胞的生長(zhǎng)，便于觀察的地塞米松藥理作用，又不會(huì)導(dǎo)致離體的腭胚突間充質(zhì)細(xì)胞的大量死亡，保證細(xì)胞良好的增殖能力。說(shuō)明這一濃度可以作為在細(xì)胞水平研究地塞米松致畸的生物學(xué)機(jī)制的參考濃度。
