實驗性質：綜合性實驗
實驗學時：4學時
實驗分組人數(shù)：4~5人
（一)實驗目的
1 復制實驗性肺水腫； 通過實驗了解肺水腫的表現(xiàn)，加深對水腫發(fā)生機制的認識；2 通過本實驗，加強與缺氧、呼吸衰竭等內(nèi)容的聯(lián)系。
（二)實驗材料
1． 實驗動物 家兔
2．實驗儀器
（1) BL－420E+系統(tǒng)⑵ 天平 ⑶ 嬰兒稱 ⑷ 聽診器
3． 實驗用藥 1％普魯卡因、肺素溶液（1250/ml)、20％磺基水楊酸溶液，生理鹽水。
4． 器械 吸管、載玻片、濾紙若干、氣管插管、zxtf.net.cn/sanji/動、靜脈插管，急性手術器械一中國衛(wèi)生人才網(wǎng)套（動脈夾2個、手術刀1把、止血鉗10把、組織剪刀1把、線剪1把、眼科剪刀1把、剪毛剪刀1把、鑷子4把、注射器1ml 3個、5ml 2個、粗細絲線各1軸)。
（三)實驗步驟
實驗組Ⅰ
1． 取家兔一只，稱體重后背位固定，1％普魯卡因局部麻醉，切開頸部皮膚，按常規(guī)手術操作，分離氣管、左側頸總動脈、右側頸總靜脈。插入氣管插管，由耳緣靜脈注入肝素溶液（1250U/kg)插入動脈導管連接血壓描記裝置。用動脈夾阻斷右頸總靜脈近心端，使之充盈，結扎遠心端，靠近心端處剪口，插入導管以備輸液。
2． 輸液前觀察血壓、呼吸曲線，取血做血氣分析、并聽診肺部呼吸音。然后通過靜脈輸入37℃～38℃生理鹽水，輸入量按100ml/kg，輸液速度為180～200滴/min。然后速度加快，幾乎呈柱狀，直至肺水腫形成。
3． 注意觀察呼吸、血壓的變化及氣管插管內(nèi)是否有粉紅色泡沫樣液體溢出， 并聽診肺部有無濕性啰音。當肺水腫出現(xiàn)時，用小吸管吸取少量氣管插管內(nèi)溢出之水腫液，備作水腫液蛋白質定性實驗。同時取血做血氣分析。然后，處死動物，夾閉氣管，打開胸腔，觀察胸腔內(nèi)及心包腔內(nèi)積液，將心包腔內(nèi)積液擠至一端，用注射器抽取少量積液備用。然后將連接胸壁的組織離斷，同時在夾閉氣管的止血鉗上端剪斷氣管，（注意防止水腫液流出)提起心肺切斷腔靜脈及主動脈，去除胸腺及周圍組織，在肺動脈與肺靜脈的近肺端用細線結扎，剪斷血管（結扎線留在肺側)以離斷心臟。用粗線在切斷氣管的分叉上1cm處進行結扎，于結扎線上端切斷氣管。用濾紙吸去肺表面的液體，稱重，計算肺系數(shù)。肉眼觀察肺大體形態(tài)的改變。切開肺臟、注意有無泡沫樣液體流出。
對氣管插管中溢出的水腫液，腹腔積液進行蛋白質定性試驗，以了解微血管通透性的改變。
實驗組Ⅱ
實驗步驟與實驗組Ⅰ不同之處是自頸總靜脈輸入生理鹽水（輸液量按100ml/kg，輸液速度為180～200滴/min )待輸入量完畢時將腎上腺素入壺（按腎上腺素0.45ml/kg)。其余步驟與實驗組Ⅰ相同。
（四)注意事項
1． 輸液管道內(nèi)一定要將空氣排凈，避免氣體栓塞。
2． 輸液速度要保證180～200滴/min，以避免出現(xiàn)不典型肺水腫，同時也拖延實驗時間。
3． 測血氣時注意血液與空氣隔絕，及時用膠塞封住針頭。
4． 解剖取肺時，注意勿損傷肺表面并避免擠壓肺組織，以防水腫液流出，影響肺系數(shù)值。肺系數(shù)＝肺質量（克)/體質量（㎏) 正常值4.1～5
5． 取心包液和腹水時，不要刺破血管，尤其取腹水時要做正中切口，否則影響蛋白測定值。
附錄
水腫液蛋白質定性-------磺基水楊酸法
原理：磺基水楊酸是一種生物堿試劑，在酸性環(huán)境時可與蛋白質的氨基結合形成不溶于水的鹽類。
試劑：20%磺基水楊酸溶液
操作：取載玻片三張，于每張玻片兩端滴上需測的水腫液2~3滴。向玻片一端的水腫液中加入20%磺基水楊酸1滴，另一端加1滴生理鹽水，二者進行比較，如水腫液變混濁即為陽性，清析透明為陰性。
(五)思考題
1． 大量快速輸入生理鹽水發(fā)生急性肺水腫的機制？
2． 臨床上對心衰患者在輸液時應注意什么？
3． 急性肺水腫與缺氧、呼吸衰竭等章節(jié)的聯(lián)系及發(fā)生機制？
4． 水腫液蛋白測定的意義？
（丁春華)
