一、檢測的原理
借助抗原和抗體在體外特異結(jié)合后出現(xiàn)的各種現(xiàn)象，對樣品中的抗原或抗體進行定性、定量、定位的檢測。
1．抗原與抗體的親和力(affinity)抗原抗體的結(jié)合就像酶與底物的結(jié)合，激素與其受體的結(jié)合一樣不是化學的反應(yīng)，而是非共價鍵的可逆的結(jié)合�？乖瓫Q定簇和抗體分子可變區(qū)互補構(gòu)型，造成兩分子間有較強的親和力�？臻g構(gòu)型互補程度不同，抗原和抗體分子之間結(jié)合力強弱也不同。互補程度高，則親和力強。此外，反應(yīng)溫度、酸堿度和離子濃度對抗原和抗體分子上各基因的解離性和電荷特性也有重要的影響，抗體與抗原決定簇之間的結(jié)合力大小可用親合力來表示。高親合力的抗體與抗原的結(jié)合力強，即使抗原濃度很低時也有較多的抗體結(jié)合抗原形成免疫復合物。
2．抗原或抗體外檢測原理根據(jù)抗原抗體結(jié)合形成免疫復合物的性狀與活性特點，對標本中的抗原或抗體進行定性、定位或定量的檢測。定性和定位檢測比較簡單，即用已知的抗體和待檢樣品混合，經(jīng)過一段時間，若有免疫復合物形成的現(xiàn)象發(fā)生，就說明待檢樣品中有相應(yīng)的抗原存在。若無預(yù)期的現(xiàn)象發(fā)生，則說明樣品中無相應(yīng)的抗原存在。同理也可用已知的抗原檢測樣品中是否有相應(yīng)抗體。
對抗原或抗體進行定量檢測時，以反應(yīng)中加入抗原和抗體的濃度與形成免疫復物的濃度呈函數(shù)關(guān)系。
�。�1)根據(jù)免疫復合物產(chǎn)生的多少來推算樣品中抗原（或抗體)的含量：在一定的反應(yīng)條件下，加入的已知抗體（或抗原)的濃度一定，反應(yīng)產(chǎn)生的免疫復合物多少與待檢樣品中含有相應(yīng)抗原（或抗體)量成正比。也就是抗體濃度一定時，免疫復合物越多則樣品中的抗原量也越多。可用實驗性標準曲線推算出樣品中抗原（或抗體)的含量。如免疫單向擴散試驗、免疫比濁試驗和酶聯(lián)免疫檢測等都屬于這類方法。
�。�2)抗原或抗體效價滴定的原理：當抗原抗體復合物形成多少不能反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)強弱時，就不能以檢測反應(yīng)強度來對抗原或抗體進行定量。在實際工作中，把濃度低的反應(yīng)成分（抗原或抗體)的濃度固定，把濃度高的另一種反應(yīng)成分作一系列稀釋。例如用人血清作抗原免疫3只家兔，比較3只家兔產(chǎn)生抗體的多少，即滴定3只兔血清抗體效價，可用雙向瓊脂擴散法來滴定，例如將抗體濃度固定，將抗原作不同的稀釋度，分別將抗原或抗體滴入瓊脂的相應(yīng)小孔中，觀察免疫兔血清與不同稀釋度的抗原出現(xiàn)明顯沉淀淺的抗原稀釋度（如甲兔的抗體效價為1/2000，而丙免的是1/8000則可比較出后者比前者產(chǎn)生抗體的效價要高)。也就是表示效價的稀釋度越高，樣品中所含待檢成分越多。因人血清（抗原)和抗體（免疫兔血清)相比，濃度高，故應(yīng)稀釋抗原。
二、抗原或抗體檢測的實用意義
1．抗體檢測的意義檢測抗體可用于評價人和動物免疫功能的指標�？贵w用于臨床治療或?qū)嶒炑芯繒r也需做純度分析和定量測定。臨床上檢測病人的抗病原生物的抗體、抗過敏原的抗體、抗HLA抗原的抗體、血型抗體及各種自身抗體，對有關(guān)疾病的診斷有重要意義。
2．抗原檢測的意義可做為抗原進行檢測的物質(zhì)可分為以下四類：
（1)各種微生物及其大分子產(chǎn)物：用于傳染病診斷、微生物的分類及鑒定以及對菌苗、疫苗的研究。
（2)生物體內(nèi)各種大分子物質(zhì)：包括各種血清蛋白（如各類免疫球蛋白、補體的各種成分)、可溶性血型物質(zhì)、多肽類激素、細胞因子及癌胚抗原等均可做為抗原進行檢測。在對這些成分的生物學作用的研究以及各種疾病的診斷有重要意義。
�。�3)人和動物細胞的表面分子：包括細胞表面各種分化抗原（如CD抗原)、同種異型抗原（血型抗原或MHC抗原)、病毒相關(guān)抗原和腫瘤相關(guān)性情抗原等。檢測這些抗原對各種細胞的分類、分化過程及功能研究、對各種與免疫有關(guān)的疾病的診斷及發(fā)病機制的研究，均有重要意義。
（4)各種半抗原物質(zhì)：某些藥物、激素和炎癥介質(zhì)等屬于小分子的半抗原，可以分別將它們偶聯(lián)到大分子的載體上，組成人工結(jié)合的完全抗原。用其免疫動物，制備出各種半抗原的抗體，應(yīng)用于各種半抗原物質(zhì)的檢測，例如對某些病人在服用藥物后進行血中藥物濃度的監(jiān)測。對運動員進行服用違禁藥品的檢測，都是應(yīng)用半抗原檢測的方法。
