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免疫酶細胞化學

  免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(zhì)(抗原/抗體)在組織細胞內(nèi)存在部位的一門新技術(shù):即預先將抗體與酶連結(jié),再使其與組織內(nèi)特異抗原反應,經(jīng)細胞化學染色后,于光鏡或電子顯微鏡下觀察分析的形態(tài)學研究方法。

  40多年前,Coons及其同事利用熒光色素(FITC)標記抗體而開創(chuàng)的免疫熒光抗體技術(shù),具有一定的靈敏性、特異性、操作簡單等優(yōu)點,但亦存在抗體用量大,標本不能長期保存、需較昂貴的熒光顯微鏡等問題。幾乎在同一時期,電子顯微鏡在醫(yī)學生物學領(lǐng)域中得到了廣泛的應用。為克服熒光抗體法的不足、并能在超微結(jié)構(gòu)水平定位抗原物質(zhì)的存在部位,Nakane(1966)等成功地引入了酶代替熒光色素標記抗體,進行組織細胞內(nèi)抗原或半抗原的定位,開辟了酶標抗體技術(shù)免疫酶細胞化學之路。

  Sternberger(1970)等人在此基礎(chǔ)上又作了改良,建立了非標記抗體酶法以及PAP法。酶標抗體法確立至今已經(jīng)27個春秋,不斷發(fā)展、成熟。各種新技術(shù)的引入,使新抗體相繼問世,應運而生的抗體制造、經(jīng)銷商遍布世界各地,使ICC技術(shù)得到了更廣泛的推廣和應用,成為當今形態(tài)學研究領(lǐng)域中不可缺少的手段;同時也有為臨床病理診斷、腫瘤性質(zhì)的判定、預后的估測等提供重要依據(jù),是臨床實驗室常規(guī)檢查法之一。近年,伴隨分子生物學、分子遺傳學的驚人進步,ICC技術(shù)在基因表達產(chǎn)物的觀察,細胞功能動態(tài)分析中,亦發(fā)揮著重要作用。在此,結(jié)合,筆者經(jīng)驗,介紹ICC染色中的主要程序:組織標本的固定、切片、染色原理及步驟、結(jié)果判定及一些進展、特殊應用等供讀者參考。

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