膠體金制備完畢后須經(jīng)電鏡下質(zhì)量鑒定才能應(yīng)用。
一、膠體金顆粒直徑測定
用預先處理好的覆有Formvar膜的鎳網(wǎng)浸入膠體金溶液內(nèi),取現(xiàn)放在空氣中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射電鏡下觀察,主要觀察金顆粒的大小,符合不符合所需要的顆粒直徑,金顆粒是否均勻一致,有無橢圓形及多角形金顆粒存在。理想的金顆粒是大小基本相等,均勻一致,無橢圓形及多角形的金顆粒存在,還可以拍片放大后測量金顆粒直徑的大小。
二、膠體金金顆粒均勻度測定
一般需測量100個以上的膠體金顆粒,然后用統(tǒng)計學處理,計算膠體金顆粒的平均直徑及標準差,前者反映顆粒的大小,后者說明顆粒是否均勻一致。
三、影響膠體金顆粒大小的因素
如果有較多的大小不等的金顆粒及有橢圓形,三角形金顆粒存在應(yīng)重新制備。一般造成這種情況的主要原因是在加還原劑的時候不是迅速一次加入,而是多次加入。再者攪拌不均勻,速度太慢沒有攪拌起來,造成了顆粒大小不等。制備量的多少,容器的大小,加熱的時間等也影響膠體金顆粒的大小。制備了合格的膠體金以后,放在室溫或4℃保存。避免低溫凍存,因為凍存可導致膠體金凝集,破壞了膠體狀態(tài)。膠體金在室溫避光無灰塵的環(huán)境中可放置3個月左右。冰箱內(nèi)半年左右。根據(jù)膠體金的性質(zhì),有不穩(wěn)定和聚沉的可能性,因此,制備完畢后最好在20天以內(nèi)進行標記。