2、試劑
⑴ 1%草酸溶液：稱取10g草酸，加水至1000ml醫(yī),學(xué).全,在.線zxtf.net.cn；
⑵ 2%草酸溶液：稱20g草酸，加水至1000ml；
⑶ 維生素C尺度液：切確稱20mgVC溶于1%草酸中，并稀釋至100ml，吸5ml于50ml容量瓶中，插手1%草酸至刻度，此溶液每毫升含有0.02mgVC；
⑷ 0.02%2，6-二氯靛酚溶液：稱取2，6-二氯靛酚50mg，溶于200ml含有52mg碳酸氫鈉的熱水中，冷卻后，稀釋至250ml，過濾于棕色瓶中，貯存于冰箱內(nèi)，應(yīng)用過程中每禮拜標定一次。
標定一：吸標液（VC)5ml于三角瓶→加6%KI溶液0.5ml→加1%淀粉3滴→用0.001N KIO3標液滴定到淡蘭色。
計較：
抗壞血酸濃度（mg/ml)= （V1 × 0.088)/ V2
V1 - 滴按時耗損0.001N KIO3標液的體積（ml)
V2 -維生素C重量（g)
0.088 -1ml0.001N KIO3標液≈維生素C的量（mg/ml)
標定二：吸5ml已知濃度V C標液 → 加5ml1%草酸 → 用染料2，6-二氯靛酚滴定至溶液呈粉紅色，在15秒不褪色為終點
計較：每毫升2，6-二氯靛酚相當(dāng)于維生素C的毫克數(shù)等于滴定度（T)
T= （C × V1)/ V2
C - 維生素C的濃度（mg/ml)
V1 -維生素C的體積（ml)
V2 -耗損2，6-二氯靛酚的體積（ml)
⑸ 0.001N KIO3標液：吸0.1N KIO3溶液5ml→于500ml容量瓶內(nèi)→加水至刻度，每毫升相當(dāng)于VC0.008mg；
⑹ 0.5%淀粉溶液；
⑺ 6%KI溶液；
3、操作體例
⑴ 提�。悍Q樣50g→加2%草酸100ml→到入搗碎機中→措置→過濾→顏色若深可加白陶土來歷：
⑵ 滴定：吸5ml樣液→于三角瓶→用染料滴定至粉紅色→15秒內(nèi)不褪色
計較：
VC（mg/100g)=（V × T)/ W × 100
V -耗損染料體積（ml)
T -1ml染料所能氧化維生素C的毫克數(shù)
W- 滴按時所有濾液中含有樣品的克數(shù)
4、注重事項
⑴ 所有試劑的配制最好都用重蒸餾水；
⑵ 滴按時，可同時吸二個樣品。一個滴定，另一個作為不雅察看顏色轉(zhuǎn)變的參考；
⑶ 樣品進入嘗試室后，應(yīng)浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，損失蹤維生素C；
⑷ 貯存過久的罐頭食物，可能含有大量的低鐵浪子（Fe2+)，要用8%的醋酸庖代2%草酸。這時如用草酸，低鐵浪子可以還原2，6-二氯靛酚，使測定數(shù)字增高醫(yī),學(xué),全,在,線,提,供zxtf.net.cn，使用醋酸可以避免這種情形的發(fā)生；
⑸ 整個操作過程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化；
⑹ 在措置各類樣品時，如遇有泡沫發(fā)生，可插手數(shù)滴辛醇消弭；
⑺ 測定樣液時，需做空白對照，樣液滴定體積扣除空白體積。
二、2，4-二硝根基肼法
可測總抗壞血酸，總抗壞血酸搜羅還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸型。此法是將樣品的還原型抗壞血酸氧化為脫氫型抗壞血酸，然后與2，4-二硝根基肼浸染，生成紅色的脎。脎的量與總抗壞血酸含量成正比，將紅色脎溶于硫酸后進行比色，由尺度曲線計較樣品中總VC。
1、事理：
用酸措置過的活性碳把還原型的抗壞血酸氧化為脫氫型抗壞血酸，在繼續(xù)氧化為二酮古樂糖酸。
二酮古樂糖酸與2，4-二硝根基肼偶聯(lián)生成紅色的脎，其成色的強度與二酮古樂糖酸濃度呈正
比，可以比色定量。
2、軌范
⑴ 樣品措置與剖析
稱必然樣 → 加等量2%草酸 → 于高速搗碎機搗碎 → 取勻漿20g → 用1%草酸定容100ml → 過濾 → 取濾液10ml → 加1%草酸10ml → 加少量活性炭 → 搖1分鐘 → 靜置過濾 → 各取濾液2ml于樣品管和樣品空白管 → 各管插手1滴硫脲溶液 → 于樣品管中插手2醫(yī),學(xué).全,在.線zxtf.net.cn，4-二硝根基肼0.5ml → 分袂于兩個管加蓋 → 于37℃保溫箱3小時 → 掏出后樣品管放入冰水中 → 樣品空白管掏出后冷至室溫 → 在樣品空白管插手2，4-二硝根基肼 → 0.5ml → 樣品管和空白管都于冰浴中 → 滴加85%H2SO42ml于各管中 → 邊滴邊搖 → 防止溫度升高炭化后呈黑色 → 冰浴中30分鐘后掏出 → 室溫下放置30分鐘后，在540nm測消光值，從尺度曲線上查出響應(yīng)的含量
⑵ 尺度曲線的繪制
取5個50ml容量瓶編號 1 2 3 4 5
加VC標液0.2mg/ml 10 20 30 40 50ml
取5個比色管取響應(yīng) 2 2 2 2 2
加硫脲溶液（滴) 1 1 1 1 1
2，4-二硝根基肼（ml)0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
于37℃保溫箱3～4小時，掏出于冰浴中，然后滴加85%硫酸2.5ml→掏出放30分鐘→在540nm下測各消光值繪尺度曲線，同時做空白。
計較：每百克食物中抗壞血酸的毫克數(shù)=C/W *100
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