| 公開(公告)號 | CN1757650A |
| 公開(公告)日 | 2006.04.12 |
| 申請(專利)號 | CN200510015619.0 |
| 申請日期 | 2005.10.25 |
| 專利名稱 | 從鮮鹿茸中提取胰島素樣生長因子-1的方法 |
| 主分類號 | C07K14/65(2006.01)I |
| 分類號 | C07K14/65(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 天津大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 王金宇;李淑芬 |
| 地址 | 300072天津市南開區(qū)衛(wèi)津路92號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 天津市學(xué)苑有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 |
| 代理人 | 任 延 |
| 國省代碼 | 天津;12 |
| 主權(quán)項 | 一種從鮮鹿茸中提取胰島素樣生長因子-1的方法，其特征在于包括以下步驟：(1)超聲波強化浸提：將鮮鹿茸在4～10℃條件下粉碎，然后按質(zhì)量比加入3～10倍的pH9～12的堿性溶液作提取劑，提取溫度為20～30℃，超聲功率為120～250w，超聲浸提時間為30～60min；超聲浸提結(jié)束后在-4℃下5000～10000r/min離心20min；然后沉淀部分加入3～5倍的同樣緩沖液，重復(fù)上述步驟；合并兩次離心所得上清液；(2)超濾濃縮：在10～20℃條件下，利用孔徑為10kDa～20kDa膜將步驟(1)所得上清液進(jìn)行超濾濃縮；(3)去脂：將超濾濃縮液轉(zhuǎn)入去脂鍋內(nèi)，于5min內(nèi)加熱到45～55℃，立即在冰水浴中降溫至0～5℃，靜置3～4h，分離出下層清液；(4)酸解：利用1mol/l鹽酸或1mol/l醋酸，將步驟(3)所得下層清夜調(diào)節(jié)pH至4～6，會有沉淀析出；在-4℃下，以10000r/min的速度離心20min，除去沉淀，收集上清液；(5)離子交換層析：將步驟(4)制得的上清液直接加到陽離子交換柱上，用0.5～2.0mol/NaCl洗脫，收集含有胰島素樣生長因子-1的洗脫峰溶液。交換柱使用的填料是葡聚糖型或纖維素型弱酸性陽離子交換樹脂；(6)第二次超濾：利用孔徑為2～6kDa超濾膜將步驟(5)得到的胰島素樣生長因子-1洗脫液進(jìn)行脫鹽、濃縮，收集濃縮液；(7)冷凍干燥：將步驟(6)所得濃縮液在-20℃下預(yù)冷凍，然后在-40℃～-60℃下用冷凍干燥機進(jìn)行干燥。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種從鮮鹿茸中提取胰島素樣生長因子-1(IGF-1)的方法，屬于從鹿茸中提取活性成分的技術(shù)。利用pH9～12的碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液、碳酸氫鈉-氫氧化鈉緩沖液或稀氨水與稀酸配制而成的堿性溶液為提取劑，通過超聲波強化浸提、超濾濃縮、去脂、酸解、離子交換層析、第二次超濾和冷凍干燥等步驟提取鮮鹿茸中的IGF-1等活性多肽。采用本發(fā)明技術(shù)，IGF-1的提取率可以達(dá)到3200～3500ng IGF-1/g鮮鹿茸；而采用去離子水作提取劑，在相同工藝條件下IGF-1的提取率僅為1000ng IGF-1/g鮮鹿茸以下。制得的產(chǎn)品可應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品等諸多方面。 |
| 國際公布 |
