公開(公告)號
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CN1872996A
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公開(公告)日
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2006.12.06
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申請(專利)號
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CN200510073049.0
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申請日期
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2005.05.31
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專利名稱
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一種鐵皮石斛原球莖固體培養(yǎng)的菌根真菌誘導(dǎo)劑
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主分類號
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C12N5/04(2006.01)I
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分類號
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C12N5/04(2006.01)I;C12N1/14(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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郭順星;陳曉梅;王春蘭;孟志霞;肖培根
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地址
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100094北京市海淀區(qū)西北旺中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項
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一種制備鐵皮石斛原球莖的方法,包括步驟: (1)真菌的培養(yǎng) 將小菇屬真菌自低溫保藏的斜面試管菌種活化后,轉(zhuǎn)接于含PDA培養(yǎng)基的平皿中,于25℃恒溫培養(yǎng)18-26天,分別在菌落邊緣打孔成菌片,并以小碎塊接入液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)和發(fā)酵; 真菌液體培養(yǎng):培養(yǎng)基組成為葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、麥麩;三角瓶或其他容器振蕩培養(yǎng)真菌; (2)真菌誘導(dǎo)子的制備 上述真菌經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)后,用80-120目尼龍網(wǎng)過濾,分離菌絲體和發(fā)酵液;按下列方法制備成不同真菌誘導(dǎo)子; ①菌絲體誘導(dǎo)子:鮮菌絲體置入無菌水中,勻漿后滅菌得菌絲體誘導(dǎo)子; ②發(fā)酵液誘導(dǎo)子:發(fā)酵液分裝滅菌得真菌誘導(dǎo)子; ③混合誘導(dǎo)子:鮮菌絲體置入自身發(fā)酵液中,勻漿后滅菌得混合誘導(dǎo)子; ④混合清液誘導(dǎo)子:鮮菌絲體置入自身發(fā)酵液中,勻漿后滅菌,取其上清液得混合清液誘導(dǎo)子; (3)鐵皮石斛原球莖的固體培養(yǎng) 鐵皮石斛原球莖在1/2MS土豆固體培養(yǎng)基上,光照培養(yǎng);固體培養(yǎng)基組成為土豆、1/2MS培養(yǎng)基、蔗糖、肌醇、瓊脂; (4)鐵皮石斛原球莖與真菌誘導(dǎo)子共同培養(yǎng) 向正在生長的鐵皮石斛原球莖固體培養(yǎng)基中,加入一種滅菌的真菌誘導(dǎo)子,與其共同培養(yǎng); (5)鐵皮石斛原球莖的收獲 鐵皮石斛原球莖加入誘導(dǎo)子后繼續(xù)光照培養(yǎng)5-8周,收獲,陰干或低于60℃烘干。
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摘要
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一種菌根真菌誘導(dǎo)子在鐵皮石斛原球莖固體培養(yǎng)中的應(yīng)用技術(shù),所用的真菌為分離自蘭科藥用植物鐵皮石斛根內(nèi)的真菌MF24(Mycena sp.);先分別培養(yǎng)真菌和鐵皮石斛原球莖,再將培養(yǎng)的真菌制成誘導(dǎo)子,加入鐵皮石斛原球莖中共同培養(yǎng)。采用該項新技術(shù),可以提高鐵皮石斛原球莖的產(chǎn)量和有效成分含量。該項技術(shù)培養(yǎng)方法簡單、不添加任何激素,生產(chǎn)出的鐵皮石斛原球莖為綠色產(chǎn)品,可以代替鐵皮石斛藥材供藥用。
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國際公布
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