石斑魚病毒性神經(jīng)壞死病毒基因診斷試劑盒及檢測方法
公開(公告)號
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CN1448520A
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公開(公告)日
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2003.10.15
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申請(專利)號
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CN03114369.5
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申請日期
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2003.05.06
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專利名稱
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石斑魚病毒性神經(jīng)壞死病毒基因診斷試劑盒及檢測方法
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主分類號
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C12Q1/68
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分類號
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C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中山大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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何建國;黃劍南;黃志堅;鄧敏
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地址
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510275廣東省廣州市新港西路135號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項
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一種石斑魚病毒性神經(jīng)壞死病毒的基因診斷試劑盒,其特征是該試劑盒包括下列部件:1).RNA提取液A液,2管,內(nèi)裝Trizol液;2).B液,1管,內(nèi)裝氯仿;3).C液,1管,內(nèi)裝異戊醇;4).D液,1管,內(nèi)裝70%乙醇;5).E液,1管,內(nèi)裝DEPC水;6).RT反應(yīng)液F液,1管,內(nèi)裝RT反應(yīng)液,包括5×Buffer、dNTP、DEPC-H2O、隨機引物、RNA酶 抑制劑RNAsinRI、反轉(zhuǎn)錄酶M-MLV RT;7).RT-PCR反應(yīng)液G液,1管,內(nèi)裝RT-PCR反應(yīng)液,包括含mg2+的10×Buffer、dNTP、正向引物F1、反向引物R1、ddH2O和TaqE。F1為:5’-CGT GTC AGT CAT GTG TCG CT,R1為:5’-CGA GTC AAC ACG GGT GAA GA;8).陽性對照H液,1管,內(nèi)裝VNNV陽性模板;9).盒子;10).一塊泡沫板,其大小與上述盒子的底面相同,裝于盒子中;泡沫板上有不少于上述小管數(shù)量的小孔,上述各小管分別對應(yīng)放置于這些小孔中。
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摘要
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本發(fā)明提供一種石斑魚病毒性神經(jīng)壞死病毒(VNNV,Viral Nervous Necrosis Virus)的基因診斷試劑盒及檢測方法。該試劑盒及檢測方法是以根據(jù)病毒性神經(jīng)壞死病毒保守區(qū)序列設(shè)計的兩對引物為主體而設(shè)計的。本發(fā)明采用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù),對病毒性神經(jīng)壞死病毒的特異性DNA核酸片段進行定性檢測,簡便快速,特異性好,靈敏度高;可用于石斑魚各時期養(yǎng)殖過程中的病毒跟蹤檢測,也可用于環(huán)境監(jiān)測,避免病毒傳播流行,提高科學(xué)管理效率,具有很高的實用價值。
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國際公布
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