公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1125185C
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公開(kāi)(公告)日
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2003.10.22
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN00129641.8
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申請(qǐng)日期
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2000.09.29
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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一種快速檢測(cè)CpG胞嘧啶甲基化的方法
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主分類(lèi)號(hào)
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C12Q1/68
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分類(lèi)號(hào)
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C12Q1/68;G01N30/02
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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北京市腫瘤防治研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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鄧大君;周靜
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地址
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100034北京市西城區(qū)大紅羅廠街1號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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中國(guó)商標(biāo)專(zhuān)利事務(wù)所有限公司
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代理人
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萬(wàn)學(xué)堂
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國(guó)省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種檢測(cè)CpG胞嘧啶甲基化的方法,包括下列步驟:1〕用亞硫酸氫鈉處理部分待測(cè)樣品DNA;
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摘要
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本發(fā)明涉及檢測(cè)DNA胞嘧啶甲基化的方法,包括:1〕用亞硫酸氫鈉處理部分待測(cè)樣品DNA;2〕根據(jù)目標(biāo)片段處理前兩端不含CpG的部位,設(shè)計(jì)2對(duì)引物,對(duì)處理前、后DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增;3〕在未甲基化目標(biāo)片段的tPCR產(chǎn)物的變性(解鏈)溫度下測(cè)定樣品tPCR產(chǎn)物的色譜保留時(shí)間;4〕將tPCR產(chǎn)物保留時(shí)間明顯延長(zhǎng)樣品目標(biāo)片段的wPCR產(chǎn)物與野生型對(duì)照樣品等量混合,進(jìn)行變性和復(fù)性雜交處理,測(cè)定樣品目標(biāo)片段是否存在點(diǎn)突變。該方法能反映整個(gè)目標(biāo)片段中CpG的胞嘧啶甲基化狀態(tài),簡(jiǎn)易、快速、成本低廉、準(zhǔn)確。
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國(guó)際公布
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