公開(公告)號 | CN1137998C |
公開(公告)日 | 2004.02.11 |
申請(專利)號 | CN01108278.X |
申請日期 | 2001.02.28 |
專利名稱 | 酶解法生產(chǎn)肝素鈉 |
主分類號 | C12P19/04 |
分類號 | C12P19/04 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 灌云縣金瑞生物制品有限公司 |
發(fā)明(設計)人 | 樊永金 |
地址 | 222200 江蘇省灌云縣伊山鎮(zhèn)伊東片鄧莊工業(yè)園區(qū) |
頒證日 | 2004.02.11 |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 |
代理人 | 沈;兵 |
國省代碼 | 江蘇;32 |
主權(quán)項 | 一種生物催化法生產(chǎn)肝素鈉的方法,其特征在于所采用的催化劑為2709蛋白酶,且生產(chǎn)過程依次包括以下幾個步驟:(1)按照1∶2.3-4重量比向豬小腸粘膜中加入水,加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至9-10,升溫至50-55℃,并按每公斤小腸1.5克的比例加入2709蛋白酶,保溫攪拌45分鐘后,按豬小腸粘膜重量每公斤加入0.12-0.15千克粗鹽,升溫至60-70℃;(2)催化反應產(chǎn)物用150-180目棉布篩過濾,分離除去雜質(zhì)蛋白質(zhì),得到過濾液;(3)在每公斤豬小腸粘膜獲得的濾液中加入0.1-0.13公斤D204強堿性陰離子交換樹脂,反應2-3小時,分離母液得到離子交換后的樹脂;(4)以完全浸沒離子交換后的樹脂為量,分別用濃度為每升0.04-0.06摩爾的氯化鈉、每升0.4-0.6摩爾的氯化鈉溶液洗滌攪拌15-20分鐘,分離母液,得到洗滌后的樹脂;(5)分兩次以完全浸沒洗滌后的樹脂為量,加入每升3-4摩爾的氯化鈉反應20-30分鐘,分離樹脂,收集合并兩次反應液體產(chǎn)物;(6)用每升2摩爾的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)上述反應液體產(chǎn)物的pH值至11-12,升溫至60-80℃,用150-180目多層棉布篩過濾,濾液在攪拌下加入重量濃度為85-95%的乙醇,調(diào)節(jié)液體比重為乙醇比重計計量35-45度,室溫下靜置2-4小時,分離液體,得到沉淀物;(7)按重量比1∶2比例,將沉淀物用重量濃度95-99%的乙醇脫水2-3次,60-80℃溫度下干燥即得肝素鈉。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種利用生物發(fā)酵工藝生產(chǎn)肝素鈉的方法。該方法采用2709蛋白酶作為催化劑,D204強堿性陰離子交換樹脂作為離子交換樹脂,并采用150-180目多層布篩進行過濾,有效克服了原生產(chǎn)工藝生產(chǎn)周期長、水解不完全、收率低、所得產(chǎn)品純度低、產(chǎn)生的廢水嚴重污染環(huán)境等缺陷,采用此工藝生產(chǎn)1億國際單位肝素鈉只需豬小腸粘膜1800-2000根,產(chǎn)品純度達80效價/毫克以上。 |
國際公布 |