一組生產(chǎn)用哺乳類細(xì)胞人源抗體高效表達(dá)載體
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公開(公告)號
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CN1150331C
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公開(公告)日
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2004.05.19
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申請(專利)號
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CN01102214.0
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申請日期
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2001.01.18
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專利名稱
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一組生產(chǎn)用哺乳類細(xì)胞人源抗體高效表達(dá)載體
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主分類號
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C12N15/85
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分類號
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C12N15/85;C07K16/00
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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梁米芳;愛克哈德·博茨
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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梁米芳;李德新;愛克哈德·博茨
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地址
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100052 北京市宣武區(qū)迎新街100號
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頒證日
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2004.05.19
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種用于在哺乳類細(xì)胞中生產(chǎn)人源抗體的高效表達(dá)系統(tǒng)，是由重鏈表達(dá)載體和輕鏈表達(dá)載體組成，重鏈表達(dá)載體含有重鏈表達(dá)盒1，輕鏈表達(dá)載體含有輕鏈表達(dá)盒1，當(dāng)所述重鏈表達(dá)載體和所述輕鏈表達(dá)載體同時(shí)轉(zhuǎn)化哺乳類細(xì)胞時(shí)，能夠表達(dá)出人源全抗體；其中，重鏈表達(dá)盒1的組成依次為啟動(dòng)子EF-1α，抗體基因先導(dǎo)序列，重鏈可變區(qū)基因(VH)的克隆位點(diǎn)BssHII和BstEII，來自人淋巴細(xì)胞基因組DNA的包括內(nèi)含子在內(nèi)的IgG基因重鏈全長恒定區(qū)基因，牛生長因子多聚腺苷酸尾(BGH Poly A)，SV40病毒轉(zhuǎn)錄起始子和啟動(dòng)子(SV40 ori)，二氫葉酸還原酶基因(DHFR)及SV40轉(zhuǎn)錄終止信號(SV40 polyA)；輕鏈表達(dá)盒1的組成依次為啟動(dòng)子EF-1α，抗體基因先導(dǎo)序列，輕鏈可變區(qū)基因(VL)的克隆位點(diǎn)EcoRV和XhoI，來自人淋巴細(xì)胞基因組DNA的包括內(nèi)含子在內(nèi)的IgG基因輕鏈全長恒定區(qū)基因及其轉(zhuǎn)錄終止信號，SV40病毒轉(zhuǎn)錄起始子和啟動(dòng)子(SV40 ori)，二氫葉酸還原酶基因(DHFR)及SV40轉(zhuǎn)錄終止信號(SV40 poly A)。
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摘要
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一組生產(chǎn)用哺乳類細(xì)胞人源抗體高效表達(dá)載體，包括12種由不同元件定向組合而成的載體，其主要特征由真核細(xì)胞表達(dá)元件包括強(qiáng)啟動(dòng)子EF-1α、來源于人類基因組DNA或信使RNA的抗體分子輕、重鏈恒定區(qū)基因、內(nèi)在核糖體識別位點(diǎn)及二氫葉酸還原酶基因的不同形式的定向組合而成，可被用來克隆抗體可變區(qū)或Fab基因，導(dǎo)入中華地鼠卵巢(CHO)細(xì)胞后獲得不同來源抗體基因的永久性高效表達(dá)。其用途在于可被用來持續(xù)規(guī)模生產(chǎn)全人IgG抗體或人-鼠嵌合抗體制劑而用于臨床治療。
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國際公布
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