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抗真菌蛋白及其編碼DNA和摻入此DNA的宿主

公開(公告)號(hào) CN1155714C  
公開(公告)日 2004.06.30  
申請(專利)號(hào) CN97198755.6  
申請日期 1997.09.04  
專利名稱 抗真菌蛋白及其編碼DNA和摻入此DNA的宿主  
主分類號(hào) C12N15/82  
分類號(hào) C12N15/82;C12N9/02;C12Q1/68;C07K16/40;C12N15/62;A01H5/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1996.9.4 EP 96202466.7; 1997.3.19 EP 97200831.2  
申請(專利權(quán))人 辛根塔默根有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 M·H·斯圖威  
地址 荷蘭萊頓  
頒證日 2004.06.30  
國際申請 PCT/EP1997/004923 1997.9.4  
進(jìn)入國家日期 1999.04.13  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 周中琦  
國省代碼 荷蘭;NL  
主權(quán)項(xiàng) 獲得對選自疫霉屬和/或腐霉屬的真菌的易感性降低的植物的方法,所述方法包含以下步驟:(a)將嵌合DNA序列導(dǎo)入易于再生出完整植株的祖細(xì)胞,所述嵌合DNA序列包含能編碼選自SEQ ID NO:15,19,57,70,72和74描述的蛋白質(zhì)或其突變蛋白的開放閱讀框架,該突變蛋白通過替換、添加或缺失一個(gè)基酸而與所述蛋白質(zhì)不同,其中該突變蛋白具有抗疫霉屬和/或抗腐霉屬活性,所述的開放閱讀框架可操作性地與轉(zhuǎn)錄和翻譯起始區(qū)以及轉(zhuǎn)錄終止區(qū)連接,以使在對所述的真菌侵染易感的所述祖細(xì)胞中產(chǎn)生所述蛋白或突變蛋白,以及(b)所述嵌合DNA序列編碼植物選擇性標(biāo)記,以選擇所述選擇性標(biāo)記存在其中的轉(zhuǎn)化祖細(xì)胞,以及,(c)在有利于具有所述的選擇性標(biāo)記的祖細(xì)胞的條件下使所述祖細(xì)胞再生為植株,以及,(d)鑒定產(chǎn)生所述蛋白質(zhì)或所述突變蛋白的植物,由此降低所述植物對所述疫霉屬和/或腐霉屬侵染的易感性。  
摘要 本發(fā)明提供可從植物來源獲得的具有抗真菌活性,特別是抗疫霉和/或抗腐霉活性并且通過SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測定分子量為約55-65千道爾頓的分離的蛋白;以及包含能編碼根據(jù)本發(fā)明所述的蛋白的開放閱讀框架的分離DNA序列,優(yōu)選地特征在于所含的開放閱讀框架能編碼在SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:57,SEQ ID NO:70,SEQ IDNO:72或SEQ ID NO:74中所示的蛋白或其突變蛋白。本發(fā)明進(jìn)一步包括摻入了能編碼根據(jù)本發(fā)明所述的蛋白的嵌合DNA并且蛋白在其中表達(dá)的植物。本發(fā)明也證明了所述蛋白的碳水化合物化酶和優(yōu)選地己糖氧化酶活性。本發(fā)明也提供使用該蛋白或能合成該蛋白的宿主細(xì)胞來抵抗真菌,尤其是疫霉和腐霉屬種類的方法。  
國際公布 WO1998/013478 英 1998.4.2  
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