一種不需要反轉(zhuǎn)錄步驟的RNA分子PCR擴(kuò)增法
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公開(公告)號
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CN1157481C
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公開(公告)日
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2004.07.14
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申請(專利)號
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CN01104435.7
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申請日期
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2001.02.27
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專利名稱
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一種不需要反轉(zhuǎn)錄步驟的RNA分子PCR擴(kuò)增法
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主分類號
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C12P19/34
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分類號
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C12P19/34
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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黃道培
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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黃道培;范辛浩
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地址
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201206 上海市浦東新金橋路1998號
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頒證日
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2004.07.14
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京萬科園知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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張亞軍;曹詩健
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種RNA分子的PCR擴(kuò)增法，該方法不需要反轉(zhuǎn)錄步驟，它包括下列步驟：1)核酸雜交：將待測樣品中加入裂解雜交液，混勻后再加入PS-DNA，65℃保溫過夜，再加入異丙醇沉淀離心后，棄上清液；
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摘要
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本發(fā)明涉及一種不需要反轉(zhuǎn)錄的PCR RNA分子擴(kuò)增法，可用于分子生物學(xué)對疾病的診斷。對病原體，尤其是RNA病毒的確診可廣泛用于用血安全等領(lǐng)域，本方法包括產(chǎn)生一種與RNA分子互補(bǔ)的單鍵DNA保護(hù)分子(PS-DNA)，這種約300個(gè)鹼基對的單鍵DNA片斷，可以和RNA(病毒)分子形成DNA：RNA雜交鍵。又使用了一種抗體和一種酶將由雜交形成的DNA：RNA雜交鏈通過特異性抗體結(jié)合而分離出來，再把未形成DNA：RNA雜交鏈的殘留PS-DNA降解，然后就可以用常規(guī)PCR放大，進(jìn)行產(chǎn)物檢測了。該法與RT-PCR法相比較具有雜交效率高于逆轉(zhuǎn)錄效率，特異性強(qiáng)，靈敏度高，成本低，操作方便等特點(diǎn)。將適用于多種臨床用核酸檢測試劑的配制和生產(chǎn)。
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國際公布
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