公開(公告)號
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CN1171991C
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公開(公告)日
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2004.10.20
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申請(專利)號
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CN02134313.6
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申請日期
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2002.07.08
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專利名稱
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人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法
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主分類號
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C12N5/00
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分類號
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C12N5/00
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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徐如祥;姜曉丹
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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徐如祥;姜曉丹
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地址
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510282 廣東省廣州市工業(yè)大道253號珠江醫(yī)院神經(jīng)外科
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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廣州知友專利代理有限公司
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代理人
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宣國華
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法,其特征在于由以下步驟組成:(1)配制人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基的配制步驟為:a、取DMEM和F12按1∶1混合而成的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,加純凈水至濃度為10~25g/L,并充分?jǐn)嚢枞芙,制得?xì)胞的一般基礎(chǔ)培養(yǎng)液;b、再取胰島素、L-谷氨酰胺、鹽酸丁二胺、硒化鈉、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、氫化可的松、黃體酮依次加入基礎(chǔ)培養(yǎng)液中,充分?jǐn)嚢杈鶆;c、以1~10當(dāng)量濃度的氫氧化鈉調(diào)pH為7.4~8.0;d、層流細(xì)胞培養(yǎng)室抽濾消毒,4℃儲存?zhèn)溆茫?2)取步驟1配制出的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基,取新鮮血清加入培養(yǎng)基中,血清的含量為培養(yǎng)基的5~20%;將加入血清的培養(yǎng)基置于培養(yǎng)箱,在35℃~38℃、加3~7%的CO2溫箱孵育11~21天。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種人神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:1、配制由DMEM和F12以1∶1混合而成的基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胰島素、鹽酸丁二胺、硒化鈉、氫化可的松、L-谷氨酰胺、人轉(zhuǎn)鐵蛋白和黃體酮組成的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基;2、即時(shí)采集病員本人自體血清;3、將采集的病員本人自體血清加入配制出的人神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基中,在35℃~38℃、加3~7%的CO2溫箱孵育。本發(fā)明方法簡單,可重復(fù)性強(qiáng),操作簡便易行;為有關(guān)神經(jīng)干細(xì)胞及其應(yīng)用的科研、教學(xué)、臨床應(yīng)用等能起到不可估量的作用,同時(shí)也孕育著巨大的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。
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國際公布
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