公開(公告)號 | CN1563364A |
公開(公告)日 | 2005.01.12 |
申請(專利)號 | CN200410017588.8 |
申請日期 | 2004.04.09 |
專利名稱 | 三維立體培養(yǎng)和誘導骨髓間充質干細胞成軟骨細胞的方法 |
主分類號 | C12N5/08 |
分類號 | C12N5/08;C12N11/02 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 華東理工大學 |
發(fā)明(設計)人 | 周燕;譚文松;蔣丹丹;胡靜波 |
地址 | 200237上海市梅隴路130號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 中原信達知識產(chǎn)權代理有限責任公司 |
代理人 | 羅大忱 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權項 | 一種三維立體培養(yǎng)和誘導骨髓間充質干細胞成軟骨細胞的方法,其特征在于,包括如下步驟:(1)將骨髓間充質干細胞在預置有培養(yǎng)基和微載體的懸浮培養(yǎng)裝置中懸浮培養(yǎng),在攪拌下擴增骨髓間充質干細胞;所說的培養(yǎng)基為含有2%~20%體積百分比胎牛血清的α-MEM;所說的微載體為Cytodex3微載體;(2)然后將成軟骨細胞誘導培養(yǎng)基加入含收獲的Cytodex3微載體以及在其上生長的骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)裝置中,對骨髓間充質干細胞進行聚團成軟骨細胞誘導;成軟骨細胞誘導培養(yǎng)基以DMEM為基礎,添加濃度為1~10μg/ml的胰島素、1~20ng/ml的轉化生長因子β3、10~150nmol/L的地塞米松、10~100mg/ml的抗壞血酸磷酸酯、10~100mg/ml的脯氨酸、0.5~5mmol/L的丙酮酸鈉。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種三維立體培養(yǎng)和誘導骨髓間充質干細胞成軟骨細胞的方法,包括如下步驟:1.將骨髓間充質干細胞在預置有培養(yǎng)基和微載體的懸浮培養(yǎng)裝置中懸浮培養(yǎng),在攪拌下擴增骨髓間充質干細胞;2.然后將成軟骨細胞誘導培養(yǎng)基加入含收獲的Cytodex 3.微載體以及在其上生長的骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)裝置中,對骨髓間充質干細胞進行聚團成軟骨細胞誘導。本發(fā)明的方法可在短時間內一次獲得大量的軟骨細胞,降低了污染幾率,減少了細胞損傷,有利于細胞間營養(yǎng)物質的傳遞。誘導完成后可直接將該復合物移植入體內進行軟骨缺損修復實驗或為科學研究提供充足的種子細胞來源。 |
國際公布 |