公開(公告)號(hào)
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CN1570139A
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公開(公告)日
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2005.01.26
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN03141839.2
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申請(qǐng)日期
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2003.07.25
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專利名稱
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非典型肺炎冠狀病毒的基因檢測(cè)方法及試劑盒
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主分類號(hào)
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C12Q1/68
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分類號(hào)
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C12Q1/68
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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上海復(fù)旦悅達(dá)生物技術(shù)有限公司;復(fù)旦大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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袁正宏;胡蕓文
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地址
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201203上海市浦東張江高科技園區(qū)居里路1號(hào)北三樓
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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徐迅
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國(guó)省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種檢測(cè)樣品中是否存在非典型肺炎冠狀病毒的方法,其特征在于,包括步驟:(a)應(yīng)用PEG沉淀法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行濃縮;(b)抽提樣品中的病毒RNA,用特異性引物在特定的擴(kuò)增條件下進(jìn)行熒光RT-PCR擴(kuò)增;(c)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行熒光定量檢測(cè),對(duì)部分熒光定量檢測(cè)結(jié)果為陰性的可疑標(biāo)本,用特異性巢式引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增;(d)對(duì)步驟(c)的PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳,存在特異性擴(kuò)增產(chǎn)物就表示樣品中存在非典型肺炎冠狀病毒。
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摘要
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本發(fā)明提供了用于非典型肺炎冠狀病毒基因檢測(cè)的標(biāo)本濃縮、RT-PCR擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測(cè)的方法及試劑盒。該方法包括:(a)應(yīng)用PEG沉淀法濃縮標(biāo)本;(b)抽提樣品中的病毒RNA,用特異性引物進(jìn)行熒光RT-PCR擴(kuò)增;(c)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行熒光定量檢測(cè),部分熒光定量檢測(cè)結(jié)果為陰性的可疑標(biāo)本,用特異性巢式引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增;(d)對(duì)步驟(c)的PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳,存在特異性擴(kuò)增產(chǎn)物就表示樣品中存在SARS冠狀病毒。本發(fā)明方法和試劑盒可快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)SARS病毒。
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國(guó)際公布
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