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非典型肺炎冠狀病毒的基因檢測(cè)方法及試劑盒

公開(公告)號(hào) CN1570139A  
公開(公告)日 2005.01.26  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03141839.2  
申請(qǐng)日期 2003.07.25  
專利名稱 非典型炎冠狀病毒的基因檢測(cè)方法及試劑盒  
主分類號(hào) C12Q1/68  
分類號(hào) C12Q1/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海復(fù)旦悅達(dá)生物技術(shù)有限公司;復(fù)旦大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 袁正宏;胡蕓文  
地址 201203上海市浦東張江高科技園區(qū)居里路1號(hào)北三樓  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 徐迅  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種檢測(cè)樣品中是否存在非典型肺炎冠狀病毒的方法,其特征在于,包括步驟:(a)應(yīng)用PEG沉淀法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行濃縮;(b)抽提樣品中的病毒RNA,用特異性引物在特定的擴(kuò)增條件下進(jìn)行熒光RT-PCR擴(kuò)增;(c)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行熒光定量檢測(cè),對(duì)部分熒光定量檢測(cè)結(jié)果為陰性的可疑標(biāo)本,用特異性巢式引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增;(d)對(duì)步驟(c)的PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳,存在特異性擴(kuò)增產(chǎn)物就表示樣品中存在非典型肺炎冠狀病毒。  
摘要 本發(fā)明提供了用于非典型肺炎冠狀病毒基因檢測(cè)的標(biāo)本濃縮、RT-PCR擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測(cè)的方法及試劑盒。該方法包括:(a)應(yīng)用PEG沉淀法濃縮標(biāo)本;(b)抽提樣品中的病毒RNA,用特異性引物進(jìn)行熒光RT-PCR擴(kuò)增;(c)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行熒光定量檢測(cè),部分熒光定量檢測(cè)結(jié)果為陰性的可疑標(biāo)本,用特異性巢式引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增;(d)對(duì)步驟(c)的PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳,存在特異性擴(kuò)增產(chǎn)物就表示樣品中存在SARS冠狀病毒。本發(fā)明方法和試劑盒可快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)SARS病毒。  
國(guó)際公布  
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