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鱖魚傳染性脾腎壞死病毒基因診斷試劑盒及檢測方法

公開(公告)號 CN1186459C  
公開(公告)日 2005.01.26  
申請(專利)號 CN03114367.9  
申請日期 2003.05.06  
專利名稱 鱖魚傳染性脾腎壞死病毒基因診斷試劑盒及檢測方法  
主分類號 C12Q1/70  
分類號 C12Q1/70;C12Q1/68  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中山大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 何建國;鄧敏;翁少萍;黃志堅  
地址 510275 廣東省廣州市新港西路135號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu)  
代理人  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項 一種鱖魚傳染性脾腎壞死病毒的基因診斷試劑盒,其特征是該試劑盒包括下列部件:1).樣品稀釋液A液,2管,內(nèi)裝磷酸緩沖液,pH7.4;2).模板抽提液B液,1管,內(nèi)裝酚/氯仿/異戊醇,比例為25∶24∶1;3).C液,1管,內(nèi)裝5MNaCL;4).D液,1管,內(nèi)裝無水乙醇;5).E液,1管,內(nèi)裝70%乙醇;6).F液,1管,內(nèi)裝滅菌雙蒸水;7).PCR反應(yīng)液G液,1管,內(nèi)裝PCR一擴反應(yīng)液,包括ddH2O、含mg2+的10×Buffer、dNTP、外引物F1、外引物R1和TaqE;F1為:5’-AGACCCACTTGTACGGCG,R1為:5’-CCCATGTCCAACGTATAGC;8).PCR反應(yīng)液H液,1管,內(nèi)裝PCR二擴反應(yīng)液,包括ddH2O、含mg2+的10×Buffer、dNTP、內(nèi)引物F2、內(nèi)引物R2和TaqE;F2為:5’-CGTGAGACCGTGCGTAGT,R2:5’-AGGGTGACGGTCGATATG;9).陽性對照I液,1管,內(nèi)裝ISKNV陽性DNA;10).盒子;11).一塊泡沫板,其大小與上述盒子的底面相同,裝于盒子中;泡沫板上有不少于上述小管數(shù)量的小孔,上述各小管分別對應(yīng)放置于這些小孔中。  
摘要 本發(fā)明提供一種鱖魚傳染性脾腎壞死病毒(ISKNV,Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus)的基因診斷試劑盒及檢測方法。該試劑盒及檢測方法是以根據(jù)鱖魚傳染性脾腎壞死病毒基因保守區(qū)序列設(shè)計的兩對引物為主體而設(shè)計的。本發(fā)明采用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù),對傳染性脾腎壞死病毒的特異性DNA核酸片段進行定性檢測,簡便快速,特異性好,靈敏度高。可運用于鱖魚各時期養(yǎng)殖過程中的病毒跟蹤檢測,也可用于環(huán)境監(jiān)測,避免病毒傳播流行,提高科學(xué)管理效率,具有很高的實用價值。  
國際公布  
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