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重組SARS冠狀病毒S蛋白的表達(dá)和分離純化

公開(公告)號 CN1566346A  
公開(公告)日 2005.01.19  
申請(專利)號 CN03129330.1  
申請日期 2003.06.18  
專利名稱 重組SARS冠狀病毒S蛋白的表達(dá)和分離純化  
主分類號 C12N15/52  
分類號 C12N15/52;C12N15/62;C07K19/00;C07K14/165  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 衛(wèi)紅;楊晟;俞浩;謝幼華;汪垣;楊勇;張偉;鄭華寶  
地址 200031上海市岳陽路320號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 徐迅  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種制備重組SARS冠狀病毒S蛋白或片段的方法,其特征在于,該方法包括步驟:(a)提供編碼SARS冠狀病毒S蛋白或片段的核苷酸序列,其中所述的核苷酸序列含有SEQIDNO:1中第751-1925位、2005-3410位、1-1925位、32-3659位或全長1-3768位的核苷酸序列;(b)將步驟(a)中的核苷酸序列插入表達(dá)載體;(c)將步驟(b)的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞,獲得轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞;(d)在表達(dá)條件下,培養(yǎng)步驟(c)所述的宿主細(xì)胞,從而表達(dá)SARS冠狀病毒S蛋白或片段;(e)分離純化步驟(d)的SARS冠狀病毒S蛋白或片段。  
摘要 本發(fā)明提供了重組SARS冠狀病毒S蛋白的表達(dá)和分離純化。SARS病毒S蛋白基因被分段和完整地克隆到不同的細(xì)菌表達(dá)載體進(jìn)行了表達(dá)。S蛋白基因751-1925bp、2005-3410bp、1-1925bp、32-3659bp片段及全長1-3768bp DNA都在大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá),表達(dá)量分別占菌體蛋白的35%、34%、24%、17%和5%,并經(jīng)親和層析得到了純化。用本發(fā)明方法制備的重組S蛋白可用于臨床診治,疫苗制備和結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究。  
國際公布  
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