公開(公告)號 | CN1194094C |
公開(公告)日 | 2005.03.23 |
申請(專利)號 | CN03113968.X |
申請日期 | 2003.03.21 |
專利名稱 | 酵母菌表達系統(tǒng)中表達人卵透明帶ZP3蛋白的方法 |
主分類號 | C12N15/81 |
分類號 | C12N15/81;C07K14/435 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 暨南大學 |
發(fā)明(設計)人 | 謝琪璇;潘善培 |
地址 | 510632 廣東省廣州市天河區(qū)黃埔大道西601號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 廣州華進聯(lián)合專利商標代理有限公司 |
代理人 | 王東亮 |
國省代碼 | 廣東;44 |
主權項 | 一種酵母菌表達系統(tǒng)中表達人卵透明帶ZP3蛋白的方法,采用受體菌GS115、目的蛋白基因及載體質粒、線性化酶等;包括的步驟有擴增目的蛋白的基因片段、重組質粒的構建、重組質粒的篩選和鑒定、重組質粒導入Pichiapastoris表達系統(tǒng)、重組子(工程菌)的篩選、重組蛋白的表達、重組蛋白的純化,其特征是:所述目的蛋白基因是23~408位氨基酸的基因片段;所述的載體質粒是pPIC9k;所述重組質粒構建時,插入該載體質粒的ZP3目的基因片段是在前面引入了6個組氨酸序列的ZP323~408位氨基酸序列的基因片段;所述的重組質粒導入前,先將重組質粒用SacI酶進行線性化,然后從酵母基因組的AoxI基因處插入。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種酵母菌表達系統(tǒng)中表達人卵透明帶ZP3蛋白的方法,載體質粒為pPIC9k,目的蛋白選用了23~408位氨基酸,串聯(lián)組氨酸序列片段連在目的蛋白的N末端,導入前采用SacI酶對重組質粒進行線性化。表達生成的ZP3蛋白分泌及溶解性好,便于應用。 |
國際公布 |